RNAi研究角蛋白18在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节

摘要

目的 观察不同中医治法对大鼠肝癌角蛋白18(CK18)表达的调控差异,及其在人肝癌细胞增殖中的作用.方法 (1)采用DEN诱发大鼠肝癌模型,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治法治疗后,检测肝癌组织(和正常肝组织)CK18表达的差异;(2)设计2个人CK18基因siRNA靶点,将重组质粒电转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异.结果 (1)芯片结果显示,CK18基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的轻度调控作用,其中健脾益气治法下调作用较明显;(2)采用MTT法筛选到一个CK18基因RNA干扰有效靶序列,转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;(3)实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达已明显降低.结论 肝癌细胞恶性增殖有赖于CK18基因的高表达,目前常用治法对该基因的调控作用有限,因而该基因可望作为肝癌疗效筛选评价指标.