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人胰岛素MIP融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化

     

摘要

MIP即人胰岛素B27赖氨酸去三肽胰岛素(B27K-DTrI)的前体.B27K-DTrI是一种新型单体速效胰岛素类似物,其单体性质好,生物活性高,是潜在的速效人胰岛素药物.将构建好的重组质粒ppSUMO-MIP转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,利用IPTG进行诱导表达.对MIP融合蛋白的诱导表达时间进行一系列的优化,结果表明:重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中最优的表达条件为TB培养基、0.1 mM IPTG,15℃诱导过夜.通过表达条件的优化,每升菌液可获得30.1 mg的融合蛋白粗品.为进一步制备单体胰岛素B27K-DTrI打下了基础.

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