GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及纯化

摘要

优化GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的表达条件,并对其表达产物进行纯化.通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件,SDS-PAGE电泳分析以确定GST-LRF融合蛋白表达的最佳条件.并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱和电洗脱法纯化目的蛋白.结果表明:重组质粒转化菌E.coli BL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导5 h时,GST-LRF融合蛋白表达量最高,经电洗脱法纯化得到了 GST-LRF融合蛋白.已确定GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌的最佳表达条件,并纯化得到目的蛋白,为进一步制备抗LRF的单克隆抗体及LRF功能的研究奠定了基础.