Taqman探针RT-qPCR法检测柑橘黄龙病与海南柑橘主产区黄龙病现状

摘要

为柑橘黄龙病快速准确检测与海南柑橘黄龙病防控提供方法和依据支持,采用Taqman探针RT-qPCR法检测了红肉蜜柚、红江橙植株不同部位组织中柑橘黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiatic-us,Las)的含量与海南柑橘主产区主栽品种斑驳黄化型叶样的Las含量.结果表明:采用Taqman探针RT-qPCR法可实现对Las的灵敏快速检测,检测极限为1.49×107个/g叶中脉.在疑似感染Las的红肉蜜柚和红江橙植株根、茎、叶、梢等组织中均检测出Las,但不同组织的含量差异较大.其中:红肉蜜柚的次级根中Las含量最高、达2.31×1011个/g,新梢中Las含量最低、为1.15×107个/g;红江橙的新叶中Las含量最高、达3.65×1011个/g,主根中的Las含量最低、为1.51×109个/g.在部分表现正常的柑橘叶片中也检测出Las,但斑驳黄化型叶片Las含量显著高于表型正常叶片,老叶高出104～106倍,新叶高出10～100倍.海南柑橘主产区主栽品种的斑驳黄化型叶片中均含有Las.研究采用的Taqman探针RT-qPCR法可快速、精准地检测出由Candidatus Liberibacter asiaticus(Las)引起的黄龙病,检测结果显示海南柑橘主产区黄龙病危害严重.