咖啡酸对阿霉素心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的探讨咖啡酸(CA)对阿霉素(ADM)诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用不同浓度ADM诱导建立心肌细胞H9c2损伤模型,确定ADM诱导的最佳浓度。其次,在心肌损伤模型的基础上给予不同浓度CA,培养24 h确定最适CA浓度。将H9c2心肌细胞分为模型组(ADM组)、治疗组(ADM+CA组)和空白对照组(Control组),采用MTT法测定心肌细胞的存活率,用HE染色观察心肌细胞组织形态学变化。测定H9c2心肌细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位变化及Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性,并运用Western blot检测NF-κB-p65的表达水平。结果选择2.0μmol/L ADM作为诱导浓度,并选择4.0μmol/L CA用于后续试验。与Control组比较,ADM组中心肌细胞纤维排列紊乱,肌纤维变形严重;LDH和ROS水平升高,线粒体膜电位升高,且Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性降低,NF-κB-p65蛋白表达增高。与ADM组比较,ADM+CA组中心肌细胞肌束排列整齐,LDH和ROS水平降低,线粒体膜电位降低(P<0.05),且线粒体Na^(+)-K^(+)-ATP和Ca^(2+)-ATP酶活性提高(P<0.05),NF-κB-p65蛋白表达降低(P<0.05)。结论CA通过抗氧化应激、降低线粒体膜电位、提高H9c2细胞内ROS水平,并且通过调控NF-κB信号通路,参与保护ADM诱导的心肌损伤过程。