胶质瘤干细胞分泌的外泌体对缺氧/复氧损伤的血管内皮细胞的影响

摘要

目的 探讨胶质瘤干细胞(GSCs)分泌的外泌体对缺氧/复氧损伤的人来源脑微血管内皮细胞(HBMECs)的影响.方法 体外培养人来源胶质瘤U87细胞系肿瘤干细胞,对培养成功的肿瘤细胞球,常规采用免疫组织化学染色方法、诱导分化2方面进行鉴定,采用QIAGEN试剂盒提取干细胞培养液中的外泌体,将HBMECs随机分为3组:① 正常对照组(CON):含10％的无外泌体血清的1640细胞培养液常规培养的HBMECs;② 缺氧/复氧组(H/R):对血管内皮细胞给予5h缺氧,再进行复氧1h处理;③ 干细胞分泌的外泌体预处理组(GSCs-Exo+H/R):在H/R处理前,采用60μg/ml的GSCs-Exo孵育HBMECs.在处理结束后,分别检测3组细胞的增殖活力、迁移能力、凋亡情况.结果 免疫组织化学荧光染色法证明培养的GSCs中特异性表达Nestin和CD133,肿瘤球细胞诱导分化可见GFAP和Neun表达阳性.与CON组比较,H/R组的HBMECs增殖活力大大降低,迁移能力下降明显,细胞凋亡率增加显著(P<0.05).与H/R组比,GSCs-Exo与HBMECs共孵育,可明显提高内皮细胞的增殖活力,促进细胞迁移,抑制HBMECs凋亡(P<0.05).结论 在神经胶质瘤缺氧/复氧微环境中,胶质瘤干细胞分泌的外泌体可以发挥保护HBMECs的作用.