kshv-mir-k12-1-5p靶向调控CDKN1A影响卡波西肉瘤的细胞周期

摘要

目的 研究kshv-mir-k12-1-5p通过靶向调控细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)影响卡波西肉瘤(KS)的细胞周期.方法 生物信息学软件预测kshv-mir-k12-1-5p是否有CDKN1A的结合位点;双荧光素酶实验检测kshv-mir-k12-1-5p是否靶向结合CDKN1A;将kshv-mir-k12-1-5p模拟物(mimics)/抑制物(inhibitor)分别转染到卡波西肉瘤细胞株(SLK)中,Western blot和qRT-PCR方法检测kshv-mir-k12-1-5p对CDKN1A的调控作用;PI法检测kshv-mir-k12-1-5p对KS细胞周期的影响.结果 Mirbase靶基因预测软件分析显示:kshv-mir-k12-1-5p与CDKN1A的3′非翻译区(3′UTR)有结合位点;荧光素酶活性结果分析证实kshv-mir-k12-1-5p可特异性的作用于结合位点(P<0.01);Western blot和qRT-PCR结果显示:在蛋白水平和mRNA水平上,kshv-mir-k12-1-5p可显著降低CDKN1A的表达水平(P<0.01);PI实验结果显示:与其余各组比较,kshv-mir-k12-1-5p mimics组PI值(51.43±0.75％)最高(P<0.01),能加速KS细胞周期进程;与其余各组比较,kshv-mir-k12-1-5p inhibitor组PI值(32.74±1.28)％最低(P<0.01),能减慢KS细胞周期进程.结论 CDKN1A是kshv-mir-k12-1-5p的靶基因,kshv-mir-k12-1-5p可能通过靶向抑制CDKN1A的表达影响卡波西肉瘤的细胞周期.