高糖刺激的巨噬细胞源外泌体对小鼠肾组织中TGF-β1/Smad3通路的影响作用

摘要

cqvip:目的探讨高糖刺激的巨噬细胞源外泌体对C57小鼠肾组织中TGF-β1/Smad3通路的影响作用。方法动物分组为NG-Exo组(正常糖刺激的巨噬细胞外泌体组),MC-Exo组(甘露醇刺激的巨噬细胞外泌体组),HG-Exo组(高糖刺激的巨噬细胞外泌体组)。将不同糖刺激下巨噬细胞分泌的外泌体通过尾静脉注射到雄性SPF级C57BL/6小鼠体内,并于8周后收集尿液及肾脏标本,通过尿白蛋白试剂盒检测尿蛋白排泄率,HE染色和PAS染色观察肾小球系膜细胞增生和基质扩张程度,并计算系膜扩张指数。免疫组化检测小鼠肾脏内巨噬细胞CD68浸润及细胞外基质Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)与纤连蛋白(FN)的表达,Western blot检测肾组织中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和细胞外基质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Col-Ⅳ、FN以及TGF-β1/Smad3通路蛋白表达变化。结果 HE染色和PAS染色显示HG-Exo组小鼠肾组织系膜增殖程度增高,系膜扩张评分明显高于NG-Exo组和MC-Exo组;免疫组化显示HG-Exo组小鼠肾组织中巨噬细胞CD68及细胞外基质Col-Ⅳ与FN表达高于NG-Exo组和MC-Exo组。Western blot显示HG-Exo组小鼠肾组织中炎性因子TNF-α、pro-IL-1β、IL-1β与细胞外基质α-SMA、Col-Ⅳ、FN表达均高于NG-Exo组和MC-Exo组;且TGF-β1/Smad3通路相关蛋白表达增加。结论高糖刺激的巨噬细胞源外泌体可以引起小鼠肾组织中炎症及系膜细胞和基质的增加,其机制可能与TGF-β1/Smad3信号通路激活有关。