Sedlin蛋白稳定表达细胞株的建立

摘要

目的 建立稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,研究Sed-lin蛋白在细胞内的分布.方法 扩增SEDL基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pCDGFP中,将重组表达质粒转染至HEK 293细胞,用G418筛选阳性克隆,荧光显微镜和Western blot检测Sedlin蛋白的表达,并观察Sedlin蛋白在HEK 293细胞中的分布.结果 经测序鉴定,成功构建了SEDL基因的真核表达载体,转染HEK 293细胞后,Western blot检测,证明SEDL基因能够稳定有效的表达,荧光观察显示,Sedlin蛋白在细胞核和细胞质中都有表达.结论 成功建立了稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,Sedlin蛋白广泛分布于整个细胞中.