茶树细胞色素P450基因CYP710A1的克隆及差异表达特征分析

摘要

茶树细胞色素P450在茶树抵抗病虫害侵染过程中发挥重要作用。本研究利用NCBI中的茶树转录组数据库,获取了茶树细胞色素P450中的CYP 710A1基因,通过RT-PCR及RACE技术克隆了该基因全长。通过分子生物学软件分析了该蛋白的氨基酸结构、蛋白质理化性质、蛋白功能域及系统进化树,并通过荧光定量技术(qRT-PCR)检测了该基因在不同叶片中的表达含量。结果表明,CYP710A1基因全长1911 bp,包含1506 bp的编码序列(ORF),能够编码502个氨基酸,分子量大小为57.06 kDa,理论等电点为7.64,包含一个P450蛋白结构域(Pfam domain)和一个跨膜结构域(transmembrane structure)。该基因与风铃椒C.baccatum亲缘关系较近,而与博落回M.cordata亲缘关系较远。同时,在单芽的表达量最低,在三叶中的表达量最高,三叶中的最高表达量是单芽的38.17倍。