利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1Ac10基因的解离载体

摘要

将cry1Ac10基因和苏云金芽胞杆菌的复制起始区连接在一起,并在其两侧按相同方向各连接一个来自苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430的解离位点,构成转移单位.再将革兰氏阳性细菌的抗性标记基因和大肠杆菌克隆载体pUCl9与之连接,获得含crylAc10基因的解离载体pBMl3801.将其转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变体,再导人含解离酶基因的辅助质粒pBMB1200.在解离酶作用下,两个解离位点间发生重组,消除基在操作中的抗性标记基因等非必需基因片段,获得仅保留有完整crylAc10基因和来自苏云金芽胞杆菌质粒复制起始区,在无抗生素选择压力下能稳定遗传的重组质粒pBMB80lB.