苏云金芽胞杆菌转座子整合载体的构建

摘要

利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430的转座机制构建了可用于将外源基因整合到染色体的整合载体系列.将Tn4430的解离酶基因(tnpI)和转座酶基因(tnpA)移至两个倒转重复的反向重复序列之外,并用多克隆位点取代;将这种转移结构置入不稳定的穿梭载体pBMB622N中,获得pBMB-F7和pBMB-R14.当红霉毒抗性基因插入其中的多克隆位点后,在BMB171菌株中可将红霉素抗性基因整合到染色体上.利用这一系统可将目标基因整合到染色体,用作构建工程菌的载体,同时tnpI-tnpA基因会随着质粒的消除而消失.