环境样品中DNA的分离纯化和文库构建

摘要

采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA.所获得纯品DNA的产量为每克样品2～16ug.对纯品DNA进行限制性内切酶处理后,构建了以pUC18为载体的DNA文库.建库效率为从每克环境样品获得约103～104个含3～8kb外源随机插入片段的克隆.通过DNA序列测定和基因注释,对从文库中随机选取的克隆进行了分析,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因.本文所做的尝试对于保存、研究和开发未培养微生物基因资源具有意义.