抗冷冻蛋白基因遗传转化草菇的研究

摘要

采用RT-PCR技术从瑞典的北极云杉卷叶蛾幼虫中扩增出抗冷冻蛋白基因,利用基因枪法遗传转化草菇.PCR检测和Southem杂交结果证明,抗冷冻蛋白基因已整合进草菇基因组.低温胁迫试验结果表明,转基因草菇具有较强的耐低温能力.转基因草菇生物学特性观测结果显示,大多数草菇转化子的生长速率明显地慢于对照的宿主菌株,多数转化子的菌丝也明显地比宿主菌丝细弱.转化子筛选结果表明,采用三轮的转化子筛选程序,即第一轮在固体培养基上筛选、第二轮和第三轮在液体培养基中筛选,有利于获得真实转化子和淘汰假转化子.转基因草菇一代低温胁迫结果证明,转基因草菇后代仍然具有较强的低温耐受能力,这说明转基因草菇的耐低温性能在世代之间是稳定的.