利用免疫蛋白组学方法,鉴定出链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)江苏分离株HA9801具有免疫反应性的蛋白HM3.应用同源性比对、信号肽预测、跨膜区预测及亚定位预测等生物信息学方法对该蛋白进行分析,结果显示:同源性最高的蛋白为屎肠球菌胞外溶解物结合蛋白(41%);蛋白序列中含有信号肽结构;7-24位氨基酸为该蛋白的跨膜区;预测蛋白定位为除胞质外的未定位置.PCR扩增出该蛋白的一段基因定向克隆到表达载体pET-32a(+)中并转化入BL21(DE3)宿主菌.重组菌经IPTG诱导后的SDS-PAGE图谱在46kDa处出现融合蛋白的条带.Western blot表明,此融合蛋白可被SPF微型猪抗SS2血清所识别,提示该蛋白可作为该菌的亚单位疫苗的候选物.
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