小鼠巨噬细胞系体外感染卡介苗的应答

摘要

[目的]探讨小鼠巨噬细胞系RAW264.7体外感染卡介苗的应答.[方法]体外感染RAW264.7细胞23 h后,分析细胞形态和细胞表面共刺激分子的表达.然后去除培养上清中的卡介苗,继续培养不同时间,通过CFSE、annexin V/PI和Rh123标记,分析宿主细胞的应答.[结果]卡介苗感染23 h后,细胞生长状态良好,细胞内能明显观察到吞噬泡中的BCG.细胞表面共刺激分子CD40、CD54、CD80、CD86、CD11b的表达明显升高,CD11c、I-A~d以及H-2K~d的表达变化不明显.CFSE标记卡介苗后,随着培养时间的延长,荧光强度逐渐减弱,但是4天后仍然明显地高于对照组.除去培养上清中的卡介苗后继续培养,含有卡介苗的细胞逐渐减少,继续培养60 h后基本检测不到.另外,卡介苗感染不能诱导细胞凋亡,线粒体膜电位先升高后降低,5 d后,基本上与对照组一致.[结论]通过以上分析,为卡介苗免疫机理的研究提供了重要数据.