RAW264.7

摘要： 为探究金针菇多糖(FVP)和发酵金针菇多糖(FFVP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的影响与机制,以脂多糖(LPS)构建RAW264.7炎症模型,设置CON组(正常培养基)、LPS组(正常培养基+1μg/mL LPS)、FVP组(正常培养基+1μg/mL LPS+25、50或100μg/mL FVP)和FFVP组(正常培养基+1μg/mL LPS+25、50或100μg/mL FFVP),通过测定RAW264.7的细胞活力、吞噬能力、活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量以及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量与mRNA相对表达量,比较FVP和FFVP抑制巨噬细胞炎症反应的作用;以核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082处理RAW264.7,通过Western blot检测磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-1β的蛋白相对表达量,探究FVP和FFVP对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应可能的作用机制。结果表明:FVP和FFVP均能抑制LPS引起的RAW264.7 ROS和NO含量升高,浓度为100μg/mL时,两者差异显著(P<0.05);相比LPS组,FVP和FFVP分别使RAW264.7的吞噬能力提升37.65%和47.06%;FVP和FFVP降低炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的含量及mRNA相对表达量,并呈剂量依赖性。Western blot结果表明以BAY11-7082与FVP或FFVP同时处理,RAW264.7的p-IκBα、NLRP3、Caspase-1和IL-1β的蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),说明FVP/FFVP可通过降低IκBα的磷酸化抑制NLRP3信号通路的激活。综上可知,FVP和FFVP均能增强RAW264.7的细胞活力和吞噬能力,降低ROS和NO含量,通过抑制NF-κB-NLRP3信号通路的激活抑制巨噬细胞炎症反应;相同浓度下,FFVP的抗炎效果优于FVP。

摘要： 【目的】探究刺梨总三萜对免疫抑制小鼠及小鼠RAW264.7巨噬细胞的影响,综合评价刺梨总三萜的免疫活性。【方法】制备刺梨总三萜(TR),给SPF级健康昆明小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)构建免疫抑制模型,灌胃给予高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量刺梨总三萜,每天1次,连续灌胃14 d,试验同时设置空白对照组(不注射CTX,灌胃生理盐水)、模型组(灌胃生理盐水)、阳性对照组(灌胃3 mg/kg香菇多糖片),采集血样及胸腺和脾脏,测算全血白细胞数、胸腺和脾脏指数、血清细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α)水平及酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)活力、脾脏组织丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)活力;制作小鼠脾脏组织切片,HE染色后观察。检测0(空白对照组),1.25,2.5,5,10,20μg/mL(终质量浓度)刺梨总三萜对RAW264.7小鼠巨噬细胞增殖的影响,研究低、中、高剂量刺梨总三萜(终质量浓度分别为1.25,2.5,5μg/mL)对经脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞NO分泌量的影响。【结果】与模型组相比,不同剂量刺梨总三萜处理小鼠全血白细胞数量、胸腺和脾脏指数均显著或极显著升高,血清中的IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α水平大多显著或极显著升高,ACP和LDH活力极显著提高(除低、中剂量组LDH活力外);脾脏MDA含量极显著降低(P<0.01),CAT活力极显著升高(P<0.01);脾脏组织细胞数量和排列情况均得到了较大改善。1.25~5μg/mL刺梨总三萜能显著或极显著促进RAW264.7小鼠巨噬细胞增殖,5μg/mL总三萜可显著抑制LPS诱导的巨噬细胞NO的分泌。【结论】刺梨总三萜能改善由CTX诱导的免疫功能抑制,提高机体抗氧化应激能力,促进小鼠RAW264.7巨噬细胞增殖,抑制LPS诱导的巨噬细胞NO分泌,具有潜在的抗炎免疫活性。

摘要： 目的:探讨朝天罐总酚对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的调控作用。方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,以LPS诱导构建细胞炎症模型,采用MTT法测定不同浓度(1.88μg/mL、3.75μg/mL、7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL)朝天罐总酚对细胞增殖的影响,中性红吞噬实验检测朝天罐总酚对RAW264.7细胞吞噬能力的影响。根据细胞存活率和吞噬功能检测结果,设为朝天罐总酚低、中、高剂量组,Griess法检测细胞上清液一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平。结果:朝天罐总酚浓度≤15μg/mL时,其对RAW264.7细胞存活率无显著影响(P>0.05)。与空白对照比较,3.75~15μg/mL朝天罐总酚可增强RAW264.7细胞细胞吞噬能力(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组NO、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.01);与模型组比较,朝天罐总酚中、高剂量组NO、TNF-α水平降低,朝天罐总酚各剂量组IL-6水平降低(均P<0.01)。结论:朝天罐总酚可能通过抑制炎症因子产生、增强细胞吞噬功能对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞发挥抗炎作用。

摘要： 本研究旨在探讨异甘草素(ISL)对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞炎性反应的影响,及其线粒体相关机制。以体外培养RAW 264.7巨噬细胞为研究对象,采用MTT法考察ISL(5,10,20μmol/L)对RAW 264.7细胞活力的影响,Griess法检测NO含量,ELISA法检测TNF-α水平,荧光增强ATP试剂盒检测胞内ATP水平。荧光探针结合流式细胞术检测细胞总体和线粒体源ROS水平以及线粒体膜电势和线粒体质量数。免疫印迹法检测细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及调控线粒体生物发生相关蛋白的表达水平。qRT-PCR检测线粒体生物发生相关基因表达水平。结果表明,LPS成功诱导了炎症模型,ISL能够显著降低RAW 264.7细胞中NO、TNF-α的释放以及显著降低iNOS蛋白水平且呈浓度依赖性,ISL还可显著降低LPS诱导的RAW 264.7细胞内DCFH-DA和MitoSOX荧光强度水平,改善线粒体膜电势以及胞内ATP水平,显著降低由LPS刺激RAW 264.7细胞线粒体质量数的升高。另外,ISL还可改善由LPS诱导RAW 264.7细胞线粒体生物发生和动力学相关蛋白表达水平。本研究证实了ISL可以改善线粒体功能,减轻LPS诱导的炎症反应,提示ISL可以改善由LPS所致线粒体功能障碍。

摘要： 目的:检测巨噬细胞RAW264.7对H1N1型流感病毒增殖的抑制作用,初步探讨固有免疫细胞抗病毒的作用机制。方法:采用10 TCID_(50)、100 TCID_(50)和1000 TCID_(50)低、中、高剂量流感病毒A/PR/8/34(PR8,H1N1)感染RAW264.7细胞,光学显微镜和Hoechst染色观察细胞形态变化,流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡率,qPCR和流式细胞术检测Influenza NP、TLR4和NF-κB p65水平,免疫荧光染色对细胞Influenza NP、TLR4和NF-κB p65表达进行定位,qPCR和ELISA检测IL-6、TNF-α和IFN-β水平。结果:与10 TCID_(50)组比较,100 TCID_(50)组和1000 TCID_(50)组细胞凋亡率显著提高(P<0.01);qPCR、流式细胞术和免疫荧光染色显示,与对照组比较,RAW264.7细胞感染PR8后Influenza NP、TLR4和NF-κB p65水平显著提高(P<0.01),与10 TCID_(50)组比较,100 TCID_(50)组和1000 TCID_(50)组三者表达不同程度升高(P<0.05),且1000 TCID_(50)组TLR4和NF-κB p65上调幅度大于100 TCID_(50)组(P<0.05);细胞感染PR8后IL-6、TNF-α和IFN-βmRNA水平和培养液各因子浓度较对照组显著升高(P<0.01),与10 TCID_(50)组比较,100 TCID_(50)组和1000 TCID_(50)组各因子水平不同程度升高(P<0.05),且1000 TCID_(50)组较100 TCID_(50)组显著升高(P<0.01)。感染剂量与细胞凋亡率(FCM)和NP(FCM)、TLR4(FCM)、NF-κB p65(FCM)、IL-6、TNF-α和IFN-β(qPCR)水平呈正相关(r=0.634,P=0.002;r=0.747,P<0.001;r=0.812,P<0.001;r=0.790,P<0.001;r=0.805,P<0.001;r=0.874,P<0.001;r=0.863,P<0.001)。结论:巨噬细胞RAW264.7通过上调TLR4-NF-κB信号通路诱导下游炎症因子表达,发挥抗病毒增殖效应。

摘要： 旨在研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP16对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡和免疫活性的影响及其机制探讨。以OMP16处理RAW264.7细胞为模型,通过MTT以及Hoechst法检测OMP16对细胞活力的影响,通过Western blot检测Caspase-3、GRP78、CHOP的表达情况,流式细胞术检测OMP16对细胞凋亡的影响以及RTPCR检测免疫因子IL-1β、IL-6和TNF-α的变化。结果表明,OMP16能够影响RAW264.7细胞的活力,且有浓度依赖性;添加OMP16后能够显著增加凋亡标志因子Caspase-3的表达(P<0.001),并促进RAW264.7细胞的凋亡;作用24、36h之后,显著引起内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP的表达;并且能显著上调IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性因子的mRNA表达水平。布鲁氏菌OMP16能够诱导RAW264.7凋亡,OMP16显著引起内质网应激CHOP通路的激活。

摘要： 【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidases 4,GPX4)失活如何参与调控脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞,以DMSO为对照,使用0.1~5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理,通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平,确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组:对照组,添加DMSO培养24 h;FIN56(GPX4抑制剂)组,添加0.5μmol/L FIN56培养24 h;DMSO-LPS组,DMSO培养24 h后使用LPS(100 ng/mL)刺激3 h;FIN56-LPS组,FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后,利用荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,HDCFDA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,使用试剂盒法检测细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,分别使用ELISA和荧光定量PCR检测促炎细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌水平和基因表达量,使用Western blotting法检测Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)信号通路相关蛋白表达水平。【结果】与DMSO处理相比,0.5μmol/L FIN56处理巨噬细胞24 h对细胞活性无显著影响(P>0.05),且显著降低GPX4蛋白表达水平(P0.05)。【结论】GPX4失活可有效阻断JNK和c-Jun磷酸化,从而特异性抑制LPS诱导的巨噬细胞的炎症反应。该结果可为以GPX4为靶点研发抗炎治疗策略提供理论依据。

摘要： 目的考察天山堇菜七叶内酯(aesculetin,AESN)对脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7)炎症模型的保护作用及机制。方法实验设置空白对照组、LPS模型组、AESN不同浓度(0.16、0.8、4、20μmol·L^(-1))给药组以及对照药吲哚美辛(INDO,10μmol·L^(-1))组,建立LPS诱导RAW 264.7炎症模型。MTS法检测AESN对RAW 264.7细胞毒;Griess法检测一氧化氮(NO)分泌水平;ELISA法检测细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β的含量;qRT-PCR方法检测TNF-α、IL-6、IL-1β,一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;细胞免疫荧光的方法检测iNOS、p-NF-κB p65、IκBα、p-p38、p-ERK1/2蛋白表达;检测AESN对环氧酶1/2(COX 1/2)的抑制活性。结果AESN在0.16、0.8、4、20μmol·L^(-1)可明显抑制LPS诱导RAW 264.7分泌炎症介质NO,抑制iNOS mRNA及蛋白表达水平;降低细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量及mRNA表达水平。AESN还能明显抑制p-NF-κB p65蛋白表达,抑制IκBα降解,从而抑制p-NF-κB p65发生核转位;还能明显抑制pp38、p-ERK1/2核转位。AESN对COX-1、COX-2具有明显的抑制活性,IC分别为:28.1、2.3μmol·L^(-1)。结论AESN具有较好的抗炎作用,其作用机制与抑制NF-κB/MAPK信号通路有关。

摘要： 目的 探讨AngiotensinⅡ诱导巨噬细胞氧化应激反应与AMPK/SIRT1通路活化关系的机制.方法 RAW264.7细胞正常培养后给予不同浓度的AngiotensinⅡ(0、0.5、1、3、10、20μmol/L)处理24 h后,Western blot检测AMPK,p-AMPK和SIRT1的表达水平变化,和用DCFH探针检测ROS水平的变化,试剂盒检测细胞上清液中SOD活性和MDA表达量;同时采用基因编辑技术将AngiotensinⅡ的受体AT1R成功沉默后给予AngiotensinⅡ刺激,检测对AMPK,p-AMPK和SIRT1蛋白水平的影响以及使用ROS的抑制剂来观察细胞AMPK和SIRT1的变化情况.结果 20μmol/L的AngiotensinⅡ的刺激能显著抑制蛋白AMPK的磷酸化(P0.05),20μmol/L的AngiotensinⅡ明显抑制SOD活性(P<0.05),能显著增加MDA的产生.沉默了AT1R后,AngiotensinⅡ不能抑制AMPK蛋白磷酸化以及对SIRT1的表达无明显下调作用;使用ROS抑制剂后,AngiotensinⅡ处理无法降低细胞磷酸化AMPK和SIRT1的表达.结论 AngiotensinⅡ通过诱导巨噬细胞发生氧化应激反应从而引起AMPK/SIRT1信号通路的紊乱.

摘要： 目的:研究根皮素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞体外抗炎的作用机制,以全方位认识根皮素的抗炎作用机制并为临床开发新药提供理论依据.方法:CCK-8法检测根皮素对巨噬细胞增殖的影响,ELISA、实时荧光定量PCR、Western blot、荧光抗体技术(ICC-IF)分别检测TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2及Akt/NF-κB、MAPK信号通路、NF-κB P65核移位.结果:CCK-8法显示根皮素药物浓度在1μg/ml～100μg/ml时其细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38信号通路高表达(P<0.05、P<0.01、P<0.001);与模型组相比,不同剂量组含根皮素药物干预后,TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38表达下调(P<0.05、P<0.01、P<0.001).结论:根皮素能明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的炎症因子释放及TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2的mRNA及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38蛋白表达从而抑制炎症反应.

摘要： 本申请公开了一种RAW图像转换电路及RAW图像转换方法，根据初始RAW帧图像中各像素的分布位置，确定具有初始颜色分量的各像素的缓存位置，并基于缓存位置输出对应像素的插值计算阵列，像素包括待转换像素和非转换像素中的至少一种；根据插值计算阵列，生成具有标的颜色分量的待转换像素；以及根据缓存位置对应输出具有初始颜色分量的非转换像素和具有标的颜色分量的待转换像素中的至少一种；其支持像素流的流式输入和流式输出，帧图像之间不需要存在间隔，提高了转换效率；且其既可以将不需要进行转换的图像直接流式输出，也可以根据对应像素的缓存位置进行转换后流式输出对应的RAW格式的标的RAW帧图像。

摘要： 本发明涉及一种六四式铁路军用梁的体外预应力加固装置，其包括三角支架、连接体以及预应力索；述三角支架包括上、下游三角支架，上、下游三角支架之间通过横向水平杆连接；预应力索包括双耳锚固端头、张拉端头和钢绞线；连接体包括顶板以及底板；在顶板顶面上固定安装张拉螺栓和单耳A；张拉端头与张拉螺栓固定连接，双耳锚固端头与对应的上、下游三角支架；本发明通过在六四梁上弦杆安装连接体与三角支架，并在连接体与三角支架之间安装预应力索，使上弦杆各节点受到竖直向上的预应力，以抵消六四梁自重及列车通行所引起的竖向不利荷载，从而减小六四梁的下挠并改善竖杆及其它杆件的受力状况。

摘要： 本申请公开了一种RAW图像转换电路及RAW图像转换方法，根据初始RAW帧图像中各像素的分布位置，确定具有初始颜色分量的各像素的缓存位置，并基于缓存位置输出对应像素的插值计算阵列，像素包括待转换像素和非转换像素中的至少一种；根据插值计算阵列，生成具有标的颜色分量的待转换像素；以及根据缓存位置对应输出具有初始颜色分量的非转换像素和具有标的颜色分量的待转换像素中的至少一种；其支持像素流的流式输入和流式输出，帧图像之间不需要存在间隔，提高了转换效率；且其既可以将不需要进行转换的图像直接流式输出，也可以根据对应像素的缓存位置进行转换后流式输出对应的RAW格式的标的RAW帧图像。

摘要： 本发明提供的一种Raw到Raw的暗光图像增强方法，包括以下步骤：采集Raw数据作为构建的训练数据集，并对所述训练数据集进行合并与扩充；根据所述训练数据集搭建图像增强CNN网络模型，所述CNN网络模型包括多任务训练、输入层、编码过程、解码过程、跳跃连接和输出层；对所述CNN网络模型进行迭代训练，更新所述CNN网络模型的各可学习参数使其达到一定的收敛条件并完成训练；根据完成训练的所述CNN网络模型进行模型推断最终得到暗光图像增强网络模型，并通过此模型对所述Raw数据进行图像增强。通过构建数据集和模型并对其训练得出能智能处理Raw格式图像的暗光图像增强模型，从而实现Raw到Raw的暗光图像增强。

摘要： 本发明涉及一种六四式铁路军用梁的体外预应力加固装置，其包括三角支架、连接体以及预应力索；述三角支架包括上、下游三角支架，上、下游三角支架之间通过横向水平杆连接；预应力索包括双耳锚固端头、张拉端头和钢绞线；连接体包括顶板以及底板；在顶板顶面上固定安装张拉螺栓和单耳A；张拉端头与张拉螺栓固定连接，双耳锚固端头与对应的上、下游三角支架；本发明通过在六四梁上弦杆安装连接体与三角支架，并在连接体与三角支架之间安装预应力索，使上弦杆各节点受到竖直向上的预应力，以抵消六四梁自重及列车通行所引起的竖向不利荷载，从而减小六四梁的下挠并改善竖杆及其它杆件的受力状况。

摘要： 本实用新型涉及数控加工技术领域，具体涉及一种一拖六四轴异形数控设备，包括机架、安装于机架表面的夹持装置、安装于机架并位于夹持装置两侧的Y轴传动装置、传动安装于Y轴传动装置的X轴传动装置、传动安装于X轴传动装置的Z轴传动装置、及传动安装于Z轴传动装置的加工装置；所述夹持装置包括安装于机架的推进模组、传动安装于推进模组的夹持活动架、安装于夹持活动架若干组的夹持气缸、安装于机架的旋转固定模组、及安装于旋转固定模组并与所述夹持气缸相对的旋转固定轴；本实用新型用于对异形件进行夹持，夹持后通过加工装置进行加工，而且采用了六组加工结构可同时实现加工，加工效率高，同步性好。

摘要： 本实用新型涉及一种六四式铁路军用梁的预应力钢绞线锚具,其包括连接体以及固定安装在连接体底部的锚固体；连接体包括底板以及顶板；锚固体包括固定安装在底板底部的槽钢、约束板、锚板、安密封盖以及钢绞线，本实用新型受力性能良好，可同时锚固多条预应力钢绞线；约束板上设置密封圈和锚板上设置密封盖可有效减少外界环境对钢绞线的侵蚀；本实用新型结构简单，便于安装，可重复在六四式铁路军用梁上使用。

摘要： 本实用新型涉及一种六四式铁路军用梁的体外预应力支撑装置，其包括连接体、支承体以及转向装置；连接体包括底板、顶板以及第一单耳；所述支承体包括主撑杆以及辅助撑杆，辅助撑杆的另一端与主撑杆底部外侧铰连；转向装置安装在主撑杆底部；本实用新型主撑杆的长度可调；辅助撑杆可提高承载能力，防止本实用新型受压失稳，连接套管与丝杠螺纹连接，实现辅助撑杆的长度调节；本实用新型构造简单、长度可调、重复使用、受力性能好且对钢绞线的磨损小。

摘要： 本实用新型公开了一种六四式手枪战术枪套，它涉及枪套技术领域；所述枪套主体的上端设置有腰带连扣，所述腰带连扣上设置有腰带穿接槽，所述腰带连扣上设置有两长形调节槽，所述两长形调节槽设置有螺栓，且螺栓固定在连接环上，所述枪套主体上设置有枪槽，所述枪槽的一侧通过弹簧复位轴安装有扳机锁扣，所述扳机锁扣的一侧设置有解锁柄，所述解锁柄与扳机锁扣相配合；本实用新型既能满足在各种气候条件下长期使用，又能达到防丢失、防抢夺、快速出枪的战术使用效果，且能实现自动枪锁和快速解锁、快速拔枪。

摘要： 一种六四式军用梁的加强结构，包括固定在六四式军用梁标准弦杆两侧的补强槽钢，以及焊接在补强槽钢两头的连接钢板；所述补强槽钢与标准弦杆进行螺栓连接；所述连接钢板与标准弦杆焊接连接；连接钢板通过加长钢销与六四式军用梁的三角构架固定连接。补强槽钢分段设置，每段的长度与标准弦杆的主体槽钢的长度相适应，中间通过横联套管螺栓连接固定，相邻两条补强槽钢之间通过连接钢板进行连接。本实用新型设计合理，结构简单，制作方便，成本低，对现有标准六四式军用梁进行了加强处理，使其强度大大提高，节约了成品加强弦杆的用量，有效解决了现有六四式军用梁的成品加强弦杆数量少、成本高、不能满足实际需求的问题，保证了军用梁的广泛使用。