猪链球菌2型分选酶srtBCD基因敲除株的构建及其生物学特性分析

摘要

[目的]阐明分选酶srtBCD基因在猪链球菌2型致病过程中的作用.[方法]利用同源重组原理构建中间为壮观霉素、两侧为srtBCD基因上下游片段的重组质粒,将构建好的质粒电转化入猪链球菌感受态,筛选srtBCD缺失的突变株,并通过组合PCR和逆转录PCR对其进行验证.生物学功能实验研究srtBCD突变株和野毒株05ZYH33在生长速率、粘附、毒力等方面的差异.[结果]组合PCR和逆转录PCR结果均证实srtBCD突变株构建成功,体外实验结果显示srtBCD缺失后细菌的生长速率减慢,与Hep-2上皮细胞的粘附率明显降低,小鼠毒力实验数据表明突变株毒力无明显变化.[结论]猪链球菌2型srtBCD基因与细菌的粘附能力有关,为进一步研究猪链球菌2型的致病机理奠定基础.