绿色荧光蛋白标记检测鸦胆子素D抗TMV活性

摘要

以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)为报告基因,将含TMV表达载体的质粒p35S-30B:GFP转化农杆菌EHA 105,通过渗透法把经MMA诱导后的农杆菌悬浮液注射到本氏烟叶片内,测定了鸦胆子素D (Bruceine D) 对烟草植株内TMV的增殖和运动的抑制作用;通过PEG介导法把p35S-30B:GFP转化到本氏烟叶肉细胞原生质体内,测定了Bruceine D对烟草原生质体中TMV增殖的抑制效果.结果表明,在10 μg/mL浓度下,Bruceine D不仅可抑制烟草叶肉细胞原生质体中TMV的增殖,还可以抑制烟草接种叶中TMV向茎部及植株上部叶片移动,且对寄主植物不造成明显的毒害.