鱼类致病性豚鼠气单胞菌单克隆抗体-胶体金检测方法的建立

摘要

以福尔马林灭活的豚鼠气单胞菌按2.5×10~7个/只和5.0×10~7个/只分成两个剂量组免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备针对豚鼠气单胞菌的单克隆抗体(McAb),用间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行特异性筛选,获得了2株可分泌特异性McAb的杂交瘤细胞,并分别命名为3F3和2C9C3.经过鉴定,这两株McAb能够特异性的针对豚鼠气单胞菌,其抗体亚类分别为IgG_1型和IgM型;腹水效价分别为10~(-6)和10~(-5);相对亲和力较高:3F3针对豚鼠气单胞菌脂多糖表位,而2C9C3针对非脂多糖抗原位点.利用实验制备的McAb建立了以McAb为基础的双抗夹心法膜式超灵敏胶体金快速检测方法,所研制的豚鼠气单胞菌胶体金快速检测卡灵敏度好,特异性高,重复性好,检测时间快,操作简便,为水产上豚鼠气单胞菌的快速鉴定和诊断以及该菌流行的监测提供有力的工具.