广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠大脑皮质损伤的调节作用

摘要

通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80 mg·kg^(-1))构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs)(低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg^(-1)),通过制备苏木精-伊红(HE)染色切片观察小鼠大脑皮质形态变化;测定小鼠大脑皮质中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性;ELISA法检测小鼠大脑皮质中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、色氨酸羟化酶-2(tryptophan hydroxylase-2,TPH2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量。利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time, PCR)测定小鼠大脑皮质中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、5-羟色胺2C受体基因(5-hydroxy tryptamine 2C receptor,5-HT_(2C)R)、钙调蛋白基因(calmodulin,CaM)和脑源性神经营养因子基因(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA表达量;采用蛋白免疫印迹(Western blot, WB)和免疫组化(immunohistochemistry, IHC)方法测定环磷腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP responsive element-binding protein, CREB)、p-CREB、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin dependent kinaseⅡ, CaMKⅡ)和p-CaMKⅡ蛋白的表达量。结果表明:与模型组相比,SCPs各剂量组小鼠大脑皮质神经细胞数量增多,细胞间隙缩小,结构更为完整;SCPs各剂量组SOD和CAT活性显著升高,SCPs中、高剂量组GSH-Px的活性显著升高;SCPs高剂量组5-HT和TPH2含量显著升高;SCPs中、高剂量组TNF-α和IL-10的含量显著降低,SCPs各剂量组IL-1β含量显著降低;SCPs各剂量组TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA表达量均显著降低,SCPs高剂量组IL-6的mRNA表达量显著降低;SCPs中、高剂量组5-HT_(2C)R和BDNF的mRNA表达量显著升高,SCPs高剂量组CaM的mRNA表达量显著升高;SCPs高剂量组p-CREB表达量显著升高,SCPs中、高剂量组CaMKⅡ和p-CaMKⅡ表达量显著升高。研究结果表明SCPs可通过调节机体的氧化应激状态、炎症反应、5-HT的分泌水平及其受体介导的信号通路,改善免疫低下小鼠大脑皮质损伤。