一种食用菌原生质体制备新方法

摘要

建立了一种原生质体制备新方法,通过研究接种块数量和酶解时间对香菇(Lentinula edodes)和金针菇(Flammulina filiformis)原生质体制备的影响,对该方法进行了优化并利用该方法制备了糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)、双孢蘑菇(Agaricus bisporus)和中国美味蘑菇(A.sinodeliciosus)原生质体.结果 表明:在铺有玻璃纸的PDA平板(直径90mm)上分别接种7个香菇、金针菇菌丝块(直径4 mm),培养3d后将带有菌丝体的玻璃纸转移到另一个无菌培养皿中,直接在菌丝上滴加3 mL1.5％(W∶V)溶壁酶溶液,酶解60 min,单个平板制备的原生质体数量为106～107个.使用该方法成功地制备了糙皮侧耳、双孢蘑菇和中国美味蘑菇原生质体.该方法与常用的原生质体制备方法相比具有制备时间短、操作简单和不易污染的优点.