华丽龙胆GsF3'5'H和GsFNS基因的克隆及表达分析

摘要

该研究以华丽龙胆(Gentiana sino-ornata)5个不同开放阶段(H1～H5)的蓝色花冠为试材,利用RT-PCR技术克隆GsF3'5'H和GsFNS全长序列,并进行生物信息学分析,比较GsF3'5'H和GsFNS在不同组织和不同开放阶段的基因表达模式.结果显示:(1)所克隆的GsF3'5'H和GsFNS基因分别包含1560 bp和1590 bp开放阅读框(OFR),并分别编码520和529个氨基酸.(2)结构分析显示,GsF3'5'H和GsFNS均具有典型的F3'5'H和FNSⅡ蛋白保守结构域.(3)系统进化树分析表明,GsF3'5'H和GsFNS亲缘关系最近的物种是三花龙胆(Genti-ana triflora).(4)qRT-PCR结果显示,GsF3'5'H和GsFNS基因在根、茎、叶和花冠中均表达,其中GsF3'5'H基因在花冠H3阶段表达量最高.GsFNS在根中表达量最高,其次在花冠H4阶段两基因的表达均较高.研究推测,GsF3'5'H基因表达产生的飞燕草素苷和GsFNS表达产生的黄酮共着色作用可能使华丽龙胆的花冠呈更稳定艳丽的蓝色,为蓝色花分子育种提供重要的基因资源.