小麦γ-TMT基因的克隆与表达分析

摘要

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径的关键酶之一.该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘中国春’中克隆得到小麦γ-TMT基因的3个同源拷贝,其CDs(coding sequence)序列相似性为99.12％;其中Taγ-TMT-6A和Ta-γ-TMT-6B编码区长度为1 101 bp,编码366个氨基酸,而Ta-γ-TMT-6D因发生无义突变,编码365个氨基酸.生物信息学分析表明,3个蛋白分子量分别为39.58、39.53和39.50 kDa,理论等电点分别为6.67、6.41和7.08,都属于亲水性不稳定非分泌型蛋白.系统进化分析表明,小麦Ta-γ-TMT蛋白与糜子Pm-γ-TMT的亲缘关系相对较近.实时定量PCR分析表明,小麦Ta-γ-TMT基因在根、茎、叶、颖壳、种子中均有表达,在叶片中表达量最高;ABA、NaCl、PEG均能诱导Ta-γ-TMT基因的上调表达.该研究结果为进一步探讨小麦γ-TMT基因的功能奠定了基础.