小麦叶绿素酸酯a氧化酶(TaCAO)基因的克隆与表达分析

摘要

[目的]研究弱光环境下叶绿素酸酯a氧化酶(TaCAO)的表达水平变化,分析叶绿素合成途径对于弱光环境的响应.[方法]利用同源克隆,由小麦品种新冬20号克隆TaCAO并分析其序列.使用半定量PCR方法分析900、1800、3600和7200 lx光照强度下TaCAO表达量.[结果]该基因ORF长度为1653 bp,编码蛋白大小为62.12 kD,包含550个氨基酸残基,含有叶绿素转运肽和Rieske_RO_Alpha_CAO结构域,还存在一个Rieske铁硫配位中心和铁结合位点,随着光照强度的减弱,TaCAO表达量呈现上升的趋势.[结论]克隆获得的TaCAO长度为1653 bp,具有完整的CAO活性,TaCAO的相对表达量与光照强度呈反比关系.