猪耳成纤维细胞的体外培养及EGFP基因的转染

摘要

优化脂质体Liperfectamin 2000转染EGFP(加强型绿色荧光蛋白)至猪耳成纤维细胞的参数,如DNA和脂质体的用量、细胞汇合度、细胞暴露于DNA和脂质体复合物的时间.试验显示:24孔板内1.0 μgDNA和2.4 μL脂质体的用量转染效率最高,DNA和脂质体过量会对细胞产生毒性,影响转染效率;细胞汇合85%～90%才能得到较高的转染效率;细胞暴露4 h转染效率最高,时间过长反而使转染效率下降.