椰子基因组DNA的提取及RAPD反应体系的优化

摘要

以椰子叶片为实验材料,探索了椰子基因组DNA的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化,建立了椰子的优化反应体系和程序.试验最终建立的椰子RAPD反应总体积为20 μL,各有关成分的最佳浓度分别为Mg2+ 2.5 mmol/L,Taq DNA 0.75 U,dNTP 0.2 mmol/L,Primer 1 μmol/μL,模板DNA 2.5 ng/μL.PCR循环程序为:94 ℃预变性1.5 min;94 ℃变性20 s,36 ℃退火20 s,72 ℃延伸45 s,35个循环;最后72 ℃延伸3 min.