一株枯草芽孢杆菌环状糊精葡糖基转移酶的提取、纯化和性质

摘要

枯草芽孢杆菌SC3-2是一株高产环状糊精葡糖基转移酶(CGTase)的菌株,将其发酵液通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-纤维素(DEAE-cellulose-52)离子交换层析和Sephadex S-200凝胶层析进行纯化.经过几步纯化后CGTase比活力达到4 923 U/mg,纯化倍数达11.37倍,回收率为20%.通过对酶性质的测定,结果表明:在pH 6.5,30℃条件下,菌种产酶量最高;在pH 5.5～7.5,40℃以内该酶较为稳定;Mn2+和Ca2+对酶活具有一定的促进作用;EDTA、Na+、Fe3+、Cr3+、Zn2+、Cu2+对酶活影响不大;SDS、Ag+和Hg+使酶几乎失去活性.本研究为环状糊精葡糖基转移酶的应用提供了依据.