多花黑麦草种子外植体组织培养灭菌方法研究

摘要

针对多花黑麦草组织培养中的污染问题,以多花黑麦草成熟种子为外植体,进行组织培养,将组培过程中的污染物进行纯化培养、鉴定,并对组织培养中降低污染的措施进行研究.结果显示:青霉菌、曲霉菌、木霉菌、毛霉菌、根霉菌、肠杆菌、假单孢菌是引起多花黑麦草组织培养污染的主要微生物;效果最好的外植体灭菌方法是用洗涤剂混合液浸泡种子6 h,然后75%乙醇表面灭菌2 min,再用0.1%次氯酸钠进行1 h浸泡灭菌;培养基中添加70 mg/L制霉菌素,10 mg/L氨苄西林钠和0.1%次氯酸钠,可以很好地控制污染,并且2种方法对材料分化的影响都很小.