戊型肝炎病毒ORF3基因在杆状病毒系统中的表达与免疫学性质

摘要

目的利用杆状病毒系统表达戊型肝炎病毒HEV ORF3,为进一步研究免疫学性质与功能提供基础.方法通过RT-PCR方法获得HEVORF3基因的目的基因片段,插入中间转染载体质粒pVL1393,构建重组质粒,再与杆状病毒线性DNABaculoGoldTM 共转染Sf9昆虫细胞,通过同源重组得到重组杆状病毒.以此重组杆状病毒感染昆虫细胞后,对表达的重组蛋白进行免疫学检测并免疫小鼠.结果表达的重组蛋白约占昆虫细胞总蛋白的2%,可被戊型肝炎患者与实验猴阳性抗血清有效识别,并能诱导小鼠产生对HEV特异性免疫应答.结论重组杆状病毒可高效表达HEVORF3基因片段,表达产物具有HEV特异的免疫原性.