小鼠骨髓内皮细胞条件培养液支持卵黄囊造血干/祖细胞的体外生长

摘要

目的观察小鼠骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)对卵黄囊造血干/祖细胞体外生长的支持作用.方法取妊娠第8.5天的卵黄囊,经消化后获得卵黄囊细胞,取卵黄囊非贴壁细胞加入含10%mBMEC-CM和10%FBS的DMEM中培养24 h后,收集细胞做半固体培养.结果mBMEC-CM在液体培养体系中能扩增卵黄囊造血干/祖细胞使粒-巨噬系集落形成单位(granulocyte-macrophage colony ofrming unit,CFU-GM)和高增殖潜能集落形成细胞(high proliferative potential forming cell,HPP-CFC)的产率增加,经24 h液体培养后的CFU-GM和HPP-CFC的数目分别为培养0 h对照组的119.5%和130.8%(P＜0.05);mBMEC-CM联合flt3配基(flt3 ligand,FL)和血小板生成素(thrombopoietinTPO)后,其扩增CFU-GM和HPP-CFC的能力明显增强,mBMEC-CM联合FI和TPO经24 h液体培养后的CFU-GM和HPP-CFC的数目分别为培养0 h对照组的132.0%和176 9%(P＜0.01).结论mBMEC-CM对卵黄囊造血干/祖细胞的维持和扩增有促进作用,mBMEC-CM联合FL和TPO对卵黄囊造血干/祖细胞的扩增作用明显增强.