造血调控

摘要： 作为造血抑制因子之一的肿瘤坏死因子(TNF)家族主要有TNF-α和TNF-β两种,两者对干细胞和祖细胞的作用在不同的集落刺激因子(CSF)刺激下作用不同.TNF-α通过其经典途径激活核因子κB(NF-κB),其中NF-κB抑制剂(IκB)被磷酸化后释放NF-κB二聚体,易位至细胞核以结合特异性NF-κB DNA结合位点以激活基因表达,正调节参与造血干细胞(HSC)和祖细胞维持和稳态的基因转录,TNF-α通过肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)激活Notch和NF-κB信号传导途径,在炎症信号传导下促进HSC产生.TNF-β受体,即淋巴毒素-β受体(LTβR)表达于许多造血组织,TNF-β可以激活NF-κB信号通路产生一系列生物学效应,LTβR信号传导以细胞类型限制的方式导致NF-κB活化,而高原红细胞增多症(HAPC)骨髓上清中的TNF-β水平明显升高,同时骨髓CD71+细胞存在PI3K/Akt信号通路的激活,提示TNF-β在HAPC红系造血调控中可能发挥重要作用.

摘要： 造血功能不良是骨髓衰竭性疾病的共同特征,但是发病机制仍未完全阐明,是亟待解决的重要临床科学问题。生理情况下,造血干细胞受到骨髓微环境的严格调控。造血干细胞移植不仅是治疗白血病的有效方式,而且是研究造血调控的理想模型。移植后造血重建不良是研究骨髓衰竭性疾病的良好疾病模型。总之,积极探索造血调控的新机制,对于建立骨髓衰竭性疾病的新型干预策略具有重要临床转化价值。

摘要： 目的:采用条件性基因敲除技术构建造血系统间隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除(Cx43-/-)小鼠模型,并探讨Cx43在维持造血细胞自我更新及功能稳定中的作用.方法:将引进的2对转基因小鼠Cx43 loxP/loxP和Lyz-Cre/+杂交,选取F1雌性子代Cx43 loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43 loxP/loxP合笼回配,提取所获得子代小鼠鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法筛选Cx43-/-小鼠,同时分析小鼠不同器官中Cx43基因的表达差异;该类小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU;125 mg/kg)处理,在化疗前及化疗后第5、10和15天经眼球取血分析其血象变化.Cx43-/-及Cx43+/+小鼠予7.5 Gy(60 Co-γ)的致死量照射,剂量率1 Gy/min,照射后6 h分别给予事先准备就序的骨髓细胞,每只3×106细胞于尾静脉注入,2周后处死小鼠检测造血是否重建:分离股骨切片后,收集骨髓细胞进行细胞表型分析(选用的单抗为CD45R、Gr-1、CD4、CD8a、TCRαβ、Mac-1、抗sIgM、TER119、Sca-1及CD117);同时进行体外造血细胞集落实验观察造血细胞的体外增殖能力.结果:本研究通过2种转基因小鼠间杂交和回交,成功获得造血系统选择性Cx43基因敲除小鼠;该类小鼠骨髓及外周血细胞无Cx43表达,参与造血的组织,如肝脏和脾脏中Cx43表达也显著下调(P<0.01),而心脏和肾脏的Cx43表达则无影响,小鼠成年后外周血象分析并无明显异常,但应急代偿能力下降,经5-FU处理后,其造血功能恢复显著减缓,处理15 d后,Cx43+/+小鼠造血功能已接近正常水平,而Cx43-/-小鼠仍无明显的恢复迹象,血红蛋白、白细胞及血小板仍处低位,2者差别有统计学显著性(P<0.01);体外集落试验也证实Cx43-/-小鼠造血干/祖细胞的增殖能力下降,其CFU-GM或CFU-E集落数均明显少于Cx43 Lin-/c-Kit+/Sca-1+/+小鼠(P<0.01),但流式细胞术结果显示,Cx43-/-小鼠骨髓中+细胞亚群数量与Cx43+/+小鼠相比差异并无统计学显著性;Cx43-/-小鼠在化疗或移植后其骨髓造血功能重建均延迟,且化疗15 d后骨髓切片及涂片均证实其骨髓中造血细胞增生程度明显降低,脂肪组织显著增多,而且T、B细胞发育也有异常.此外,其外周血中CD4 CD4+CD8+细胞比例比野生型小鼠增多(P<0.05),但+T细胞显著减少(P<0.01),尤其是TCRαβ亚群细胞减少最为明显(P<0.01).同样,Cx43 CD45R+sIgM-/-小鼠外周血中-细胞亚群比例与野生型小鼠相比显著减少(P<0.01).结论:骨髓中Cx43基因表达在造血干/祖细胞发育(尤其是应急状态时)具重要作用,敲除Cx43基因后造血干/祖细胞增殖减缓,造血及免疫重建功能受损.

摘要： 造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,可分化为造血系统的所有细胞。Schofield[1]于1978年首次提出''造血龛(niche)''的概念,用来描述HSC所处的微环境。间充质干细胞(mesenchyma stem cells MSCs)是国内外研究最多的造血微环境的构成细胞。

摘要： 目的 观察咖啡酸(CFA)对辐射损伤小鼠造血调控因子的影响.方法 建立接受4.5 Gy X射线照射的辐射损伤小鼠模型,BALB/c小鼠随机分为空白对照组、单纯照射组和CFA组,检测小鼠血清造血调控因子G-CSF、TPO、IL-1β和TNF-α等指标水平.结果 CFA组小鼠血清的G-CSF、TPO和IL-1β水平均明显高于单纯照射组,TNF-α水平明显低于单纯照射组,具有显著性差异(P＜0.05).结论 CFA能上调辐射损伤小鼠造血调控因子G-CSF、TPO、IL-1β水平,下调TNF-α水平,从而促进辐射损伤小鼠的造血恢复.

摘要： @@Gab2作为细胞信号通路中一重要的连接蛋白，主要是通过一些细胞因子刺激酩氨酸磷酸化参与信号通路的调节作用。已有文献报道显示，Gab2可激活PI一3K和MAPK信号通路，调节造血细胞的迁移。利用Gab2基因敲除鼠模型研究其生物学功能，结果表明Gab2的缺失可导致严重的过敏反应;且可改变肥大细胞的发育。另外，Gab2作为一重要的中间调控子通过BCR -ABL调控白血病的转化。在上皮生长因子信号通路和乳腺癌细胞增殖中发挥重要作用。尽管人们对Gab2功能有一些了解，但其在造血调控中的作用一直未见报道。鉴于Gab2可能是造血调控中一重要分子，因此我们利用Gab2基因敲除鼠模型，系统研究Gab2在造血调控中的作用及对造血干/祖细胞生物学特性的影响。

摘要： TGF-β1作为造血负调控因子,主要是通过抑制处于静止期的早期造血干祖细胞进入分裂期,从而选择性和可逆性的抑制造血组织中早期细胞的增殖.然而,TGF-β1在整个造血调控中的作用却极为复杂,不同时期不同发育阶段的细胞群体对TGF-β1的反应性不尽相同.本文就TGF-β1对小鼠胚胎干细胞来源BL-CFC产生和分化的影响进行了研究.

摘要： 一氧化氮(nitric oxide,NO)是生物体内反应极强的一种自由剂,具有活泼的生物学活性,如第二信使和神经递质的作用,而且作为一种效应分子,一氧化氮还参与了杀灭病原微生物和攻击肿瘤细胞等细胞毒作用.近年来研究表明,NO还可影响造血细胞的生长分化和凋亡,参与造血调控.Bcl-2和Bax是Bcl-2家属中最主要的两个成员,分别具有抑制和促进细胞凋亡的作用,其彼此间的比例决定了细胞的生成和死亡.我们曾报道了外源性NO供体具有诱导HL-60细胞分化和凋亡和作用,在对其分子机制的实验研究中,发现Bcl-2和Bax在一氧化氮供体诱导HL-60细胞凋亡中发挥重要的作用.

摘要： 目的：探讨中药鸡血藤Spatholobus suberectus Dunn活性成分——儿茶素对小鼠骨髓细胞增殖周期及其脾细胞内造血生长因子IL-6、GM-CSFmRNA表达的影响，初步阐明其造血调控作用机理。方法：通过流式细胞仪检测技术观察儿茶素对正常及骨髓抑制小鼠骨髓细胞增殖周期的影响，同时采用RT-PCR技术，检测在儿茶素刺激条件下，小鼠脾细胞内IL-6、GM-CSFmRNA表达的变化。结果：儿茶素可促使正常及骨髓抑制小鼠骨髓细胞G0/G1期细胞比例下降，S+G2/M期细胞比例增加，并可使正常及骨髓抑制小鼠脾细胞内IL-6mRNA和GM-CSFmRNA表达显著上调。结论：儿茶素(2mg·ml-1，连续给药7天)可通过诱导脾细胞内IL-6mRNA和GM-CSFmRNA的表达，促进正常小鼠骨髓细胞进入增殖周期，并促使骨髓抑制小鼠的骨髓细胞跳出“G1期阻滞”，进入细胞增殖周期，从而加速造血干/祖细胞的增殖、分化。

摘要： 目的:探讨圣愈汤补血的作用机理与配伍机制。方法:采用60Coγ射线照射诱发的放射损伤性血虚小鼠模型,观察比较圣愈汤及其拆方对造血功能损伤的修复作用以及调控EPO对造血功能的影响。结果:圣愈汤及各拆方组能明显提高血虚小鼠血中EPO水平,熟地黄、白芍药在通过促进血虚小鼠EPO分泌,调控造血的环节上有与全方相似的作用,体现了益精补血药在补血剂中促进红系细胞生成的主导作用。当归、川芎能增强熟地、白芍提高血虚小鼠EPO水平。人参、黄芪似有抑制熟地、白芍组合以及熟地、白芍与川芎、当归组合升高血中EPO水平的作用。结论:圣愈汤调控血虚小鼠血液中EPO水平,是其有效改善血虚小鼠贫血状况,促进造血功能修复的重要环节,其补气益精生血组合,体现了既相互协同又相制为用的整体效应特点。

摘要： 目的:探讨圣愈汤补血的作用机理与配伍机制。方法:采用60Coγ射线照射诱发的放射损伤性血虚小鼠模型,观察比较圣愈汤及其拆方对造血功能损伤的修复作用以及调控EPO对造血功能的影响。结果:圣愈汤及各拆方组能明显提高血虚小鼠血中EPO水平,熟地黄、白芍药在通过促进血虚小鼠EPO分泌,调控造血的环节上有与全方相似的作用,体现了益精补血药在补血剂中促进红系细胞生成的主导作用。当归、川芎能增强熟地、白芍提高血虚小鼠EPO水平。人参、黄芪似有抑制熟地、白芍组合以及熟地、白芍与川芎、当归组合升高血中EPO水平的作用。结论:圣愈汤调控血虚小鼠血液中EPO水平,是其有效改善血虚小鼠贫血状况,促进造血功能修复的重要环节,其补气益精生血组合,体现了既相互协同又相制为用的整体效应特点。

摘要： 目的:探讨圣愈汤补血的作用机理与配伍机制。方法:采用60Coγ射线照射诱发的放射损伤性血虚小鼠模型,观察比较圣愈汤及其拆方对造血功能损伤的修复作用以及调控EPO对造血功能的影响。结果:圣愈汤及各拆方组能明显提高血虚小鼠血中EPO水平,熟地黄、白芍药在通过促进血虚小鼠EPO分泌,调控造血的环节上有与全方相似的作用,体现了益精补血药在补血剂中促进红系细胞生成的主导作用。当归、川芎能增强熟地、白芍提高血虚小鼠EPO水平。人参、黄芪似有抑制熟地、白芍组合以及熟地、白芍与川芎、当归组合升高血中EPO水平的作用。结论:圣愈汤调控血虚小鼠血液中EPO水平,是其有效改善血虚小鼠贫血状况,促进造血功能修复的重要环节,其补气益精生血组合,体现了既相互协同又相制为用的整体效应特点。

摘要： 目的:探讨圣愈汤补血的作用机理与配伍机制。方法:采用60Coγ射线照射诱发的放射损伤性血虚小鼠模型,观察比较圣愈汤及其拆方对造血功能损伤的修复作用以及调控EPO对造血功能的影响。结果:圣愈汤及各拆方组能明显提高血虚小鼠血中EPO水平,熟地黄、白芍药在通过促进血虚小鼠EPO分泌,调控造血的环节上有与全方相似的作用,体现了益精补血药在补血剂中促进红系细胞生成的主导作用。当归、川芎能增强熟地、白芍提高血虚小鼠EPO水平。人参、黄芪似有抑制熟地、白芍组合以及熟地、白芍与川芎、当归组合升高血中EPO水平的作用。结论:圣愈汤调控血虚小鼠血液中EPO水平,是其有效改善血虚小鼠贫血状况,促进造血功能修复的重要环节,其补气益精生血组合,体现了既相互协同又相制为用的整体效应特点。

摘要： 本发明涉及一种扩增造血干细胞和/或造血祖细胞的培养体系及其方法、造血干细胞以及造血祖细胞。所述培养体系包括：基础培养基，该基础培养基适于干细胞扩增；以及JNK信号通路抑制剂。本发明提供的培养体系能够在体外扩增造血干细胞，其扩增效果明显，能够将CD34+CD45RA‑标记的造血干细胞扩增近100倍。

摘要： 本文提供了制备造血干细胞或造血干祖细胞的方法、培养长期再生造血干细胞的方法，包括：1)提供造血中胚层细胞或包括造血中胚层细胞的细胞培养物；2)将所述造血中胚层细胞或包括造血中胚层细胞的细胞培养物置于造血内皮特化及内皮‑造血转换培养基中培养；以及3)让所述造血中胚层细胞表达或过表达转录因子OCT4。本文还提供了在培养基中培养长期再生造血干细胞或培养包括长期再生造血干细胞的细胞培养物的方法，包括让所述长期再生造血干细胞表达细胞因子OCT4。

摘要： 本文提供了制备造血内皮细胞的方法和制备造血干细胞的方法，包括在将诱导多能干细胞向造血内皮细胞或造血干细胞转化过程中在特定时段诱导表达转录因子LCOR、HOXA9、HOXA5、RUNX1和ERG。本文提供的方法可提高制备造血内皮细胞和/或造血干细胞(包括长期造血干细胞)的效率。

摘要： 本文提供和记载了下述通式的化合物或者其盐或前药。这些化合物可用于扩增造血干细胞和/或造血祖细胞群。特别地，所述造血细胞是人细胞。所述化合物还可用于对象中造血功能障碍/恶性肿瘤、自身免疫疾病和/或遗传性免疫缺陷疾病的药物治疗。

摘要： 本发明公开了一种低氧条件下微囊化成骨细胞支持和调控脐血造血干/祖细胞(He)体外扩增的方法，属于生物技术与组织TSPCS程领域。其特征是将人源成骨细胞使用明胶－海藻酸钠－壳聚糖(GAC)微囊包埋作为基质饲养层细胞，在5％的低氧环境中与脐血HSPCs进行共培养，收获HSPCs。本发明使用GAC微囊将人源成骨细胞与脐血HSPCs隔离开，避免了细胞污染和免疫排斥反应。而微囊的孔道又可使微囊内部成骨细胞分泌的造血生长因子扩散到HSPCs聚集处，起到刺激造血干/祖细胞扩增的作用。而微囊材料本身又对生长因子的扩散起到缓释作用，使得微囊表面生长因子浓度梯度增大，这对于生长因子的长期作用很有帮助。并且，微囊化的成骨细胞形成了3D环境，与贴壁培养的成骨细胞共培养模式相比，一方面可以使培养体系中包含更多的成骨细胞，另一方面也使其具有更大的HSPCs－OBs作用面积。此外，在5％的低氧环境中，共培养体系可以更好的模拟人体骨髓的造血微环境杗iche，成骨细胞对造血干/祖细胞的干细胞特性维持和数量扩增作用都更为显著。

摘要： 本发明公开了一种造血系统特异的周期调控相关基因及其编码的蛋白质。本发明涉及一种与细胞周期调控相关的基因及其编码的蛋白质，特别是涉及一种造血系统特异的细胞周期调控基因及其编码的蛋白质。本发明的目的是提供一种与造血系统发育分化进程相关的基因及其编码的蛋白质。本发明所提供的造血系统特异的周期调控相关基因是序列表中序列1的DNA序列；本发明所提供的蛋白质具有序列表中序列2的氨基酸序列。本发明的基因及其编码的蛋白质有望为达到体外长期维持造血干/祖细胞增殖和多潜能特性的目的提供一个新的作用靶点，或药物靶标以及蛋白类药物，并为拓展造血干/祖细胞的细胞治疗和基因治疗等研究提供足够的能长期维持、可调控细胞周期进程的理想靶细胞，促使造血细胞相关的基因治疗更加有效和广泛地应用于临床，从而创造巨大的社会效益和经济效益。

摘要： 本发明涉及一种扩增造血干细胞和/或造血祖细胞的培养体系及其方法、造血干细胞以及造血祖细胞。所述培养体系包括：基础培养基，该基础培养基适于干细胞扩增；以及JNK信号通路抑制剂。本发明提供的培养体系能够在体外扩增造血干细胞，其扩增效果明显，能够将CD34+CD45RA‑标记的造血干细胞扩增近100倍。

摘要： 本文提供了制备造血内皮细胞的方法和制备造血干细胞的方法，包括在将诱导多能干细胞向造血内皮细胞或造血干细胞转化过程中在特定时段诱导表达转录因子LCOR、HOXA9、HOXA5、RUNX1和ERG。本文提供的方法可提高制备造血内皮细胞和/或造血干细胞(包括长期造血干细胞)的效率。

摘要： 本文提供了制备造血干细胞或造血干祖细胞的方法、培养长期再生造血干细胞的方法，包括：1)提供造血中胚层细胞或包括造血中胚层细胞的细胞培养物；2)将所述造血中胚层细胞或包括造血中胚层细胞的细胞培养物置于造血内皮特化及内皮‑造血转换培养基中培养；以及3)让所述造血中胚层细胞表达或过表达转录因子OCT4。本文还提供了在培养基中培养长期再生造血干细胞或培养包括长期再生造血干细胞的细胞培养物的方法，包括让所述长期再生造血干细胞表达细胞因子OCT4。

摘要： 本发明属于医疗器械技术领域，尤其涉及一种编织型人造血管的涂层方法及编织型人造血管。本发明采用分步骤涂层方式，先对编织管坯进行涂层，坯管平整状态下涂层，使涂层溶液与人造血管的接触的表面张力一致，从而解决了涂层的均匀性，同时也有效地减小了人造血管的水渗透量；对造纹后坯管再次涂层，进一步提高了人造血管的生物相容性，此种分工序涂层方式，有效地解决了涂层均匀性问题，本发明制备的人造血管，涂层均匀，不仅水整体渗透量小，生物相容性好，而且保持了人造血管良好的弹性及顺应性，本发明制备的人造血管经过灭菌后保存，植入前无需预凝，生理盐水浸泡后可以直接用于临床移植。