大鼠TH基因mRNA的合成及其在真核细胞中的表达

摘要

目的 :克隆大鼠酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)基因的核心cDNA序列 ,并在体外合成THmR NA ,观察其在真核细胞中的表达情况。方法 :采用大鼠黒质细胞cDNA为模板 ,设计特定的引物进行PCR扩增并构建真核表达载体pcDNA 3.1/TH ,在体外转录后获得THmRNA。将获得的THmRNA转染到体外培养的NIH 3T3细胞内 ,用免疫组织化学方法和免疫印迹方法检测其表达。结果 :免疫组织化学方法和免疫印迹方法进行检测后显示转染的THmRNA可以在NIH 3T3细胞内表达TH ,时间达到两周。结论 :采用THmRNA对帕金森病进行的基因治疗可能是一条新的和有价值的途径。