NF-kB及p38MAPK信号通路对支气管上皮细胞与中性粒细胞共培养IL-6分泌的调控作用

摘要

目的探讨支气管上皮细胞（bronchial epithelial cells，BEAS-2B）与中性粒细胞（neutrophils，NEU）联合培养时IL-6分泌的机制。方法免疫磁珠法提取外周血中性粒细胞，建立中性粒细胞与BEAS-2B细胞联合培养体系。应用Roche cobas e411检测上清液中IL-6浓度。结果BEAS-2B和中性粒细胞联合培养时，上清液IL-6浓度为（3691±482．3）pg／ml，与细胞单独培养[BEAS-2B（313．4±34．7）pg／ml；NEU（219．1±11．3）pg／ml]差异有统计学意义（P〈0．001）；蛋白质印迹法（Western blotting）结果显示BEAS-2B和中性粒细胞联合培养可激活BEAS-2B细胞内NF—kB及p38MAPK的信号通路；而加入NF—kB通路抑制剂MG-132，可有效抑制上清液中IL-6的分泌[（1075．3±83．9）pg／ml vs （3691±482．3）pg／ml，P〈0．01]；p38MAPK通路抑制剂SB203580亦能抑制IL-6的分泌[（1532．8±176．1）pg／ml vs （3691±482．3）pg/ml，P〈0．01]；且MG-132的抑制效果明显好于SB2035580[（1075．3±83．9）pg／ml vs （1532．8±176．1）pg／ml，P〈0．01]；当联合使用两种抑制剂（MG-132和SB203580）时可进一步减少IL-6的分泌[（353．1±33．5）pg/ml vs （1075．3±83．9）pg／ml，P〈0．01；（353．1±33．5）pg／ml vs（1532．8±176．1）pg/ml，P〈0．01]。结论BEAS-2B细胞与NEU细胞接触后激活BEAS-2B细胞体内NF—kB及p38MAPK通路，进而调控IL-6的分泌。