黄鳝肝脏碱性磷酸酶的分离纯化及性质研究

摘要

本文通过对黄鳝内脏七种组织ALP活性调查和同工酶谱分析，发现黄鳝ALP具有组织特异性，各组织分布不同，胆中该酶比活力最高，肝中总活力最高。不同组织具有不同的同卫酶，且肠中有两个同工酶，结果表明，PMSF、NBS、TNBS、SUAN和DTT的修饰能显著抑制酶的活性，且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关；IAA和PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用。初步认为，Ser、Lys和Trp残基为黄鳝碱性磷酸酶的必需功能基团，部分二硫键对保护酶的催化能力是必需的。

目录

论文说明：资助、主要缩略词表

第一部分文献综述

1.1碱性磷酸酶的研究进展

1.1.1 ALP的检测方法

1.1.2 ALP的分离纯化

1.1.3 ALP的性质研究

1.1.4 ALP的结构和催化机理

1.1.5 ALP的基因克隆

1.1.6 ALP的生理功能

1.1.7 ALP同工酶研究

1.1.8 ALP的应用研究

1.2黄鳝ALP的研究进展

第二部分引言

2.1本研究的目的和意义

2.2本研究的主要实验内容

2.3本研究所采用的技术路线

第三部分黄鳝七种组织ALP同工酶比较分析

3.1材料与方法

3.1.1供试材料

3.1.2主要化学试剂和仪器设备

3.1.3酶活力测定

3.1.4蛋白质浓度的测定

3.1.5样品液的制备

3.1.6黄鳝部分内脏器官ALP酶活性普查

3.1.7ALP同工酶的分离及染色

3.2结果与分析

第四部分黄鳝肝脏ALP的分离纯化及性质研究

4.1材料与方法

4.1.1材料来源

4.1.2主要化学试剂和仪器设备

4.1.3酶活性的测定

4.1.4蛋白质含量的测定

4.1.5酶的分离纯化

4.1.6酶的理化性质

4.1.7酶的理化性质

4.1.8ALP的催化动力学性质研究

4.1.9 效应物对ALP的影响

4.1.10ALP功能基团的研究

4.2结果与分析

4.2.1 ALP的纯化

4.2.2 ALP的理化性质

4.2.3 ALP的催化动力学性质

4.2.4效应剂对ALP的影响

4.2.5 功能基团的研究

第五部分讨论

第六部分结论

参考文献

致谢