非综合征型白化病家系基因分析及产前基因诊断的研究

摘要

目的：①了解中国人群非综合征型白化病致病基因的主要基因类型、突变方式和突变位点的分布特征，探讨白化病的临床表型与基因类型的相关性，建立适合我国白化病患者的基因诊断方法和产前基因诊断方法。②探讨胎儿镜和基因检测两种产前诊断方法在临床上的应用价值，建立适合我国白化病人群的产前诊断方法。 方法：①收集26个无血缘关系白化病家系DNA标本共84份(其中2个家系仅收集到亲代DNA标本)，包括夫妇双方和(或)先证者外周血DNA标本64份、胎儿羊水细胞DNA标本19份、绒毛DNA标本1份。通过先证者的I临床表型将26个家系初分为OCA1A型19个，OCA2型7个。针对可能的基因类型进行家系各成员DNA标本PCR-SSCP检测，结合直接测序法检测家系OCA1、OCA2、OCA3和OCA4四种非综合征型白化病突变基因。分析其中25个家系白化病突变基因与临床表型的相关性。分析其中23个家系亲代与子代突变基因的遗传方式及产前基因诊断的可行性。②对要求胎儿镜检查的家系中的14个随访至妊娠结局，以胎儿或新生儿表型是否正常为诊断金标准，比较胎儿镜与产前基因检测两种诊断方法的优缺点。 结果：①26个家系52个预期致病等位基因中，47个等位基因检出致病性突变或新突变，突变的检出率为90％(47/52)。其中25个家系被分别确诊为19个OCA1，4个OCA4，2个OCA2。另外1个家系四种OCA基因类型均未检测到突变。19个OCA1共检测到23种突变，15种是已报道的致病性突变，8种是可疑新突变(C100P，C100T,R212T,T235G,R299C，G506L，1348insGG,IVS2-17insAC)，有待进一步确认；错义突变(15/23)是主要的突变方式；插入突变P930insC(7/38)和错义突变R299H(6/38)出现频率较高。4个OCA4检测到6种突变，5种是可疑新突变(G110A，L151S，A160G，Y266X，1-6delgtggccatgg)，其中错义突变4种，无义突变1种，缺失突变1种。2个OCA2检测到3种错义突变，均为可疑新突变(T450L，A455G,L727P)。临床上初分为OCA1A白化病患者，其表型与基因类型的符合率为84％；初分为OCA2患者，其表型与基因类型的符合率仅为29％；OCA1B、OCA2、OCA4三种基因型的临床表型间相互交叉。通过家系分析表明，22个家系44个突变等位基因均以隐性遗传的方式传给子代，符合孟德尔遗传规律。1个家系胎儿携带突变基因与杂合子父亲一致，没有携带母方的白化病基因，但生后表型为“白化病儿”，与隐性遗传规律似不相符，其原因有待进一步探讨。②14个家系中胎儿镜检查的诊断符合率92％，产前基因检测的诊断符合率为100％，产前基因诊断的准确性更高。 结论：①26个白化病家系突变基因分析结果提示，OCA1可能是我国主要的基因类型，其中插入突变P930insC和错义突变R299H可能是中国人群的主要突变方式。PCR-SSCP结合直接测序法可以检测出90％以上的基因突变，是适合我国白化病患者的基因诊断方法。②在分析家系白化病突变基因的基础上进行产前基因诊断是可行的，同传统的胎儿镜诊断方法比较，产前基因诊断准确性更高，但基因诊断不能完全替代胎儿镜检查。对于检测不到家系致病性突变基因，胎儿镜仍可作为妊娠中期重要的补充诊断手段。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

前言

材料和方法

结果、讨论和结论

第一部分 非综合征型白化病家系基因分析

结果

讨论

结论

第二部分：探讨胎儿镜和产前基因检测两种诊断方法的临床应用

结果

讨论

结论

参考文献

综述 白化病产前诊断的研究进展

附图及附表

致谢