血浆HDL组分apoCⅢ与冠心病及其HDL促炎反应的关系以及他汀治疗对其影响

摘要

本文主要从以下几部分进行阐述：
　　第一部分 血浆HDL组分apoCⅢ与冠心病的关系及他汀治疗对其影响
　　高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)作为胆固醇逆向转运(reversecholesterol transfer, RCT)的载体，被认为是心血管系统重要的保护因子。众多的流行病学和临床研究已经发现并证实了冠心病(coronary heart disease，CHD)和血浆中HDL胆固醇(HDL cholesterol，HDL-c)水平具有负相关、而和血浆中低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-c)具有正相关的关系。作为一类有效的调脂药物，他汀类(statin)药物则能通过降低血浆中致粥样硬化脂质的水平和其抗炎作用发挥保护心血管的作用。
　　随着研究的不断深入，人们发现并非所有的CHD患者都存在低HDL-c水平或高LDL-c水平的情况。近年来逐渐有研究发现，HDL的生物学功能和其自身组分的变化以及机体的病理生理状态密切相关，CHD的发生发展也与HDL中一些组分的变化相关，而非单纯地和血浆中HDL-c的水平相关。最近的研究发现，CHD患者血浆HDL中存在较高的载脂蛋白CⅢ(apolipoprotein CⅢ，apoCⅢ)水平，其能够更好地预测CHD的发生和进展。但由于他汀药物的普遍应用，血浆HDL组分apoCⅢ的含量与CHD的关系以及他汀类药物治疗后对它们的影响目前仍不十分清楚。
　　目的:
　　1.明确血浆HDL组分apoCⅢ的含量和CHD的关系。
　　2.分析研究CHD患者他汀药物治疗后血浆HDL组分apoCⅢ的含量及其与其它血脂关系的变化。
　　方法:
　　入选经冠脉造影确诊的CHD患者120例和非冠心病(non coronary heartdisease，non-CHD)患者80例。所有CHD患者均接受他汀药物治疗，并在他汀治疗3个月后接受随访。收集入选患者以及随访患者的临床资料并采集空腹静脉血，采用超速离心的方法提取血浆中HDL样品，应用ELISA的方法检测血浆和HDL样品中apoCⅢ的含量。统计学分析血浆HDL组分apoCⅢ的含量与CHD的关系以及他汀治疗后对CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ及其与CHD和血脂关系的影响。
　　结果:
　　1.CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ的含量显著高于non-CHD患者(25.05±12.98μg/mgHDL vs21.00±11.33μg/mgHDL，p＜0.05)，具有统计学意义。多因素风险回归分析显示，在校正了其它危险因素的混杂影响后，血浆HDL组分apoCⅢ的含量依然是CHD独立的风险预测因子(p＜0.05）。
　　2.他汀药物治疗能够显著地降低CHD患者血浆中TC、LDL-c和apoB等致粥样硬化血脂的水平(p＜0.001)，并升高血浆中HDL-c和apoAI等抗粥样硬化血脂的水平(p＜0.001)，但同时也升高了CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ的含量(24.26±14.80μg/mgHDL vs29.35±16.46μg/mgHDL，p＜0.05)，差异具有统计学意义。
　　3.non-CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ和血浆中TG的水平具有显著的正相关关系(R=0.62，p＜0.05)，这种相关性在CHD患者血浆中减弱(R=0.24，p＜0.05)，并在接受他汀治疗后的CHD患者血浆中消失(R=0.11，p＞0.05)。而血浆HDL组分apoCⅢ和血浆中apoCⅢ水平之间的相关性并不受疾病状态和他汀药物的影响，无论是在non-CHD患者(R=0.35，p＜0.05)还是CHD患者(R=0.31，p＜0.05)以及他汀药物治疗后的CHD患者(R=0.35，p＜0.05)血浆中均有相关性。
　　4.本研究中，我们并未发现血浆HDL组分apoCⅢ与血浆中HDL-c或LDL-c的水平具有明显的相关性。
　　结论:
　　1.CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ的含量显著高于non-CHD患者，血浆HDL组分apoCⅢ的含量和CHD之间具有正相关的关系。
　　2.他汀治疗能降低CHD患者血浆中致粥样硬化血脂指标和升高HDL-c的水平，但同时也升高了CHD患者血浆中HDL组分apoCⅢ的含量。
　　第二部分 ApoCⅢ在冠心病患者HDL促人脐静脉内皮细胞炎症反应中的作用及他汀治疗对其影响
　　高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)不仅是胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transfer, RCT)的重要载体，其也能通过抗炎抗氧化等多种生物学效应发挥对心血管系统的保护作用。众多研究发现，体内的HDL水平与AS(atherosclerosis，AS)和冠心病(coronary heart disease，CHD)的发生和发展具有负相关的关系，升高血浆中HDL的水平能够降低CHD的发病风险。
　　然而随着研究的深入，人们发现，进一步升高CHD患者血浆中HDL的水平并不能得到更多的心血管获益，HDL的生物学作用也和其组分改变以及机体的病理生理状态密切相关。急性期反应阶段和终末期肾病患者血浆中的HDL对内皮细胞(endothelial cell，EC)不再具有保护作用，反而具有一定的促进炎症反应的作用，而CHD患者血浆HDL中升高的apoCⅢ在其血浆HDL促进EC的凋亡中发挥着作用。鉴于apoCⅢ是一种具有促炎作用的载脂蛋白，目前仍不清楚CHD患者血浆HDL中升高的apoCⅢ在其血浆HDL促炎反应中是否也发挥着类似的作用。他汀类(statin)药物处了能够降低血浆中致粥样硬化脂质的水平外，其还有一定的抗炎作用，从而发挥保护心血管的作用。鉴于CHD患者血浆HDL组分及其生物学功能的改变，但目前并不清楚他汀药物治疗是否能够改善CHD患者血浆HDL的生物学功能。
　　目的:
　　1.研究apoCⅢ促炎反应的时间和剂量依赖性。
　　2.研究apoCⅢ在CHD患者HDL促炎反应中的作用。
　　3.研究他汀药物治疗后对冠心病患者血浆HDL促炎反应的影响以及apoCⅢ在他汀治疗后CHD患者血浆HDL促炎反应中的作用。
　　方法:
　　以体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical venous endothelial cell，HUVEC)为研究对象，模拟人体环境利用同一剂量的apoCⅢ刺激HUVEC不同的时间和利用不同剂量的apoCⅢ刺激HUVEC研究apoCⅢ促炎反应的时间和剂量依赖性。并利用提取的CHD患者血浆HDL样品在100μg/ml的条件下刺激HUVEC评价其促炎反应的作用，然后利用apoCⅢ抗体中和CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ的作用后促炎反应的变化探索apoCⅢ在CHD患者血浆HDL促炎反应中的作用。通过比较他汀药物治疗前后CHD患者血浆HDL促炎反应的变化评价他汀治疗对CHD患者血浆HDL促炎反应的影响，并利用抗体中和的方法探索apoCⅢ在他汀治疗后CHD患者血浆HDL促炎反应中的作用。
　　本部分研究中，我们以血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule1，VCAM-1)，细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule1，ICAM-1)，单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein1，MCP-1)和白介素6(interleukin6，IL-6)等炎性因子的分泌和表达来评价促炎反应情况。
　　结果:
　　1.研究发现，随着apoCⅢ作用于HUVEC浓度的增加或时间的延长，炎性因子IL-6和MCP-1的分泌以及VCAM-1和ICAM-1的表达逐渐增多和增加。
　　2.apoCⅢ在CHD患者血浆HDL促炎作用中发挥着重要的作用，同对照组相比，CHD患者血浆HDL能够显著地促进炎性因子MCP-1的分泌以及VCAM-1和ICAM-1的表达。用apoCⅢ抗体中和CHD患者血浆HDL组分apoCⅢ的作用能显著地降低ICAM-1和/或VCAM-1的表达。
　　3.他汀治疗并不能显著改善CHD患者血浆中HDL的促炎反应作用。ApoCⅢ也在他汀药物治疗后CHD患者血浆HDL促炎反应中发挥着重要的作用。
　　结论:
　　1.ApoCⅢ的促炎反应呈时间和剂量依赖性。
　　2.ApoCⅢ在CHD患者血浆HDL促炎反应中发挥着重要的作用。
　　3.他汀药物治疗并不能改善CHD患者血浆HDL的促炎反应作用，apoCⅢ仍然是他汀药物治疗后CHD患者血浆HDL促炎作用的重要因素。

目录

声明

摘要

前言

1 血脂紊乱与冠心病

2 HDL与冠心病

3 ApoCⅢ与冠心病

4 冠心病与他汀治疗的研究现状

第一部分 血浆HDL组分apoCⅢ和冠心病的关系及他汀药物治疗对其影响

1 研究背景

2 研究目的

3 研究方法

3．1 临床资料的收集

3．2 实验室研究和检测

3．3 血浆标本的采集和处理

3．4 HDL样品的提取

3．5 HDL样品的浓度及纯度测定

3．6 HDL组分apoCⅢ含量和血浆apoCⅢ浓度的测定

3．7 统计学方法

4 研究结果

4．1 入选患者的基线资料

4．2 HDL组分apoCⅢ含量和冠心病的关系

4．3 他汀治疗对冠心病患者HDL组分apoCⅢ含量的影响

4．4 HDL组分apoCⅢ含量和其它血脂水平的相关性

5 讨论

6 第一部分小结

第二部分 ApoCⅢ在冠心病患者HDL促人脐静脉内皮细胞炎症反应中的作用及他汀治疗对其影响

1 研究背景

2 研究目的

3 研究方法

3．1 临床资料的收集

3．2 实验室研究

3．3 血浆标本的采集以及HDL样品的提取和处理及检测

3．4 细胞培养

3．5 细胞干预及样品的收集和处理

3．6 细胞炎性因子表达的检测

3．7 统计学方法

4 研究结果

4．1 入选患者的基线资料

4．2 ApoCⅢ促炎反应呈时间和剂量依赖性

4．3 ApoCⅢ在冠心病患者HDL促炎反应中的作用

4．4 他汀治疗对冠心病患者血浆HDL促炎作用的影响

4．5 ApoCⅢ在他汀治疗后冠心病患者血浆HDL促炎反应中的作用

5 讨论

6 第二部分小结

研究总结

参考文献

论文综述 ApoCⅢ和CHD的关系以及调脂药物对其影响的研究进展

个人简介

致谢