HIV--1慢性感染者抗病毒治疗后外周血HIV--1 DNA的变化规律和影响因素研究

摘要

目的：比较全血与外周血单个核细胞(PBMCs)中HIV-1DNA检测结果的一致性;探索HIV-1慢性感染者有效抗病毒治疗后外周血HIV-1DNA的变化规律和影响因素;建立预测长期治疗后HIV-1DNA是否低于100拷贝/106PBMCs的统计模型。 方法：本研究共纳入607例慢性期HIV-1感染者，包括490例全国多中心队列患者和117例北京协和医院感染科门诊患者。入选患者均完成2年以上规律随诊，HIV-1RNA在治疗一年内均低于50拷贝并且在后续的随访过程中维持病毒学抑制，基线和96周数据资料完整。利用实时定量PCR方法，检测了患者外周血中总HIV-DNA。利用广义估计方程和二元逻辑回归方法建立了HIV-1DNA预测模型。 结果：1.22例患者的全血与PBMCs中HIV-1DNA水平没有统计学差异(2.89±0.42vs2.87±0.38log10拷贝/106PBMCs，p=0.573);两种样本检测HIV-1DNA结果Pearson相关系数为0.925(p＜0.001);组内相关系数为0.920(p＜0.001);Bland-Altan法95％一致性界限为-0.293～0.332。 2.在长期有效地抗病毒治疗过程中，HIV-1DNA的变化分为两个时相，从基线(3.04±0.47log10拷贝/106PBMCs)到6个月（2.51±0.48log10拷贝/106PBMCs）HIV-1DNA迅速下降，从6个月到6年HIV-1DNA基本维持不变;治疗2年时，92例(18.8％)患者HIV-1DNA低于100拷贝/106PBMCs，其影响因素为基线HIV-1DNA以及CD4计数;基于此二因素的统计模型可以预测治疗2年时HIV-1DNA低于100拷贝/106PBMCs的可能性(敏感性为71.67％，特异性为80.17％)。治疗前和（或）治疗2年后HIV-1DNA较高组患者中，CD4＜200个/μL的比例也较大。 3.21例(4.3％，21/490)慢性期患者在抗病毒治疗2年后HIV-1DNA低于检测下限（20拷贝/106PBMCs）。与对照组相比，此21人在治疗2年时CD8计数较低（511±191vs715±256个μL，p=0.013）、CD4/CD8比值较高(1.04±0.37vs0.72±0.32，p=0.002);治疗2年时较高的CD4/CD8比值是决定HIV-1DNA低于检测下限的独立影响因素(p=0.017)。 结论：1.全血与PBMCs两种样本中HIV-1DNA的检测结果具有很好的一致性，全血可以替代PBMCs用于HIV-1DNA检测; 2.慢性期感染者在抗病毒治疗后，体内HIV-1DNA的变化分为两个时相;基线HIV-1DNA和CD4计数是决定治疗2年后H-V-1DNA低于100拷贝/106PBMCs的独立预测因素;除了较低的基线HIV-1DNA外，治疗2年时的CD4/CD8比值是决定HIV-1DNA是否低于20拷贝/106PBMCs的因素; 3.HIV-1DNA与疾病进展、免疫重建密切相关，HIV-1DNA水平越高，CD4计数越低，处于艾滋病期的患者比例越大; 4.以基线HIV-1DNA和CD4计数建立的HIV-1DNA预测模型，可以很好的预测治疗后HIV-1DNA是否低于100拷贝/106PBMCs，该模型的敏感性为71.67％，特异性为80.17％。

目录

英文缩略词

引言

研究对象与方法

1研究对象

1．1队列患者

1．2门诊患者

2材料

2．1试剂

2．2耗材

2．3仪器设备

3方法

3．1全血、血浆及PBMCs的采集、分离和冻存

3．2 PBMCs的复苏

3．3全血、PBMCs中DNA的提取

3．4 HIV-1 DNA的定量检测

3．5 HIV-1 DNA检测结果的换算

3．6血浆HIV-1病毒载量的检测

3．7外周血T淋巴细胞亚群的检测

3．8统计学分析

结果

1．1入组患者的基本特征

1．2全血和PBMCs中HIV-1 DNA的检测结果的一致性

第二部分：HIV-1慢性感染者外周血中HIV-1 DNA的下降规律和影响因素研究

2．1研究路线

2．2慢性期初治队列患者的基线特征

2．3抗病毒治疗过程中HIV-1 DNA的下降规律

2．4影响HIV-1 DNA结局(96周时低于100拷贝／106 PBMCs)的基线因素

2．5 HIV-1 DNA的临床意义

2．6 HIV-1 DNA的预测模型

第三部分：治疗2年后HIV-1 DNA低于20拷贝／106 PBMCs的影响因素研究

3．1研究对象

3．2患者的基线特征

3．3抗病毒治疗过程中病毒学和免疫学指标的动态变化

3．4影响治疗96周时HIV-1 DNA低于20拷贝／106 PBMCs的因素

讨论

结论

参考文献

综述 HIV-1 DNA储存库的临床研究进展

个人简历

致谢

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