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【6h】

Lassomycin类套索多肽生物合成途径中的O--甲基转移酶的鉴定和表征

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摘要

缩略词(Abbreviations)

第一章绪论

1.1.1非核糖体肽(NRPs)

1.1.2环二肽(CDPs)

1.1.3核糖体肽(RiPPs)

1.2套索多肽

1.2.1套索多肽的结构特征与分类

1.2.2套索多肽类似物的发现策略

1.2.3套索多肽的生物合成机制

1.2.4套索多肽的功能

1.2.5套索多肽的修饰

1.3套索多肽的降解

1.4本课研究内容和意义

第二章套索多肽的生物合成

2.1引言

2.3实验仪器与试剂

2.3.1实验仪器

2.3.2实验试剂

2.4实验方法

2.4.1基因组挖掘和鉴定两种推定的lassomycin类套索多肽的生物合成基因簇

2.4.2含有lassomycin类套索多肽生物合成基因簇的重组菌株的构建

2.4.3套索多肽的生物合成

2.5结果分析与讨论

2.5.1基因组挖掘和鉴定两种推定的lassomycin类套索多肽的生物合成基因簇

2.5.2套索多肽生物合成结果

2.6本章小结

第三章stspM生化性质的表征及相关的生物信息学分析

3.1引言

3.2本章研究内容

3.3实验仪器与试剂

3.3.1实验仪器

3.3.2实验试剂

3.4实验方法

3.4.1 stspM基因片段的克隆

3.4.2 stspM的异源表达与纯化

3.4.3 stspM的结构建模

3.4.5 stspM的底物特异性研究

3.4.6甲基化的时间恻量

3.4.8 pH对stspM生物值化活性的影响

3.4.9 stspM米氏常数的测定

3.4.10 stspM活性中心的突变以及突变体活性的检测

3.4.11含有甲基转移酶的套索多肽生物合成基因簇的生物信息学分析

3.5结果分析与讨论

3.5.1 stspM基因片段的克隆

3.5.2 stspM的异源表达与纯化

3.5.3 stspM的结构建模

3.5.4体外前体肽甲基化测定

3.5.5 stspM的底物特异性研究

3.5.6甲基化的时间过程测量

3.5.7 stspM最适生物催化温度

3.5.8 pH对stspM生物催化活性的影响

3.5.9 stspM米氏常数的测定

3.5.10 stspM活性中心的突变以及突变体活性的检测

3.5.11含有甲基转移酶的套索多肽生物合成基因簇的生物信息学分析

3.6本章小结

第四章总结与展望

4.1工作总结

4.2工作展望

参考文献

致谢

研究成果及发表的学术论文

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