一种不依赖限制性核酸内切酶和DNA连接酶的盐芥cDAN文库的构建及其在耐盐资源基因挖掘中的应用

摘要

盐芥(Thellungiella halophila)是一种与模式生物拟南芥(Arabidopsis thaliana)亲缘关系很近的十字花科且能在高盐的环境下生存的盐生植物。为从这种生物中挖掘耐盐基因,我们用盐胁迫对其处理后构建了盐芥cDNA文库。文库的构建完全不依赖于限制性核酸内切酶和DNA连接酶,而使用一种改进了的cDNA合成和依靠重组的cDNA文库的构建方法。这种cDNA文库的构建程序大大简化,而且质量得到提高。同样通过重组克隆,Entry cDNA文库穿梭到双元载体pCB406,得到盐芥cDNA表达文库,用于转化和表达,创制大量转基因株系,挖掘功能基因。

目录

摘要

Abstract

致谢

缩略词表

背景综述

1、植物耐盐资源基因挖掘研究工作的意义

1.1 高盐的危害

1.2 高盐研究的意义

2、模式生物拟南芥和盐芥简介

2.1 拟南芥

2.2 盐芥

3、植物耐盐机制研究概况

4、耐盐基因挖掘的技术平台

4.1 基于GATEWAY~(TM)克隆技术构建盐芥CDNA文库

4.2 基于农杆菌浸花转化法创制盐芥CDNA转化体库

4.3 耐盐突变体高通量筛选

4.4 耐盐基因克隆和功能验证

材料和方法

结果

讨论和分析

结论和展望

参考文献

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