沉默ARID1A对胃癌MGC-803细胞增殖抑制的影响

目录

声明

前言

1 材料与方法

1.1实验材料

1.1.1 MGC-803细胞株

1.1.2试剂

1.1.3 仪器

1.2.1 shRNA-ARID1A质粒载体构建

1.2.2载体酶切

1.2.3 PCR鉴定阳性克隆转化子

1.2.4测序鉴定

1.3慢病毒包装与质量检测

1.3.1质粒转染与慢病毒收获

1.3.2慢病毒浓缩与纯化

1.3.3慢病毒质量检测

1.4 慢病毒感染细胞

1.4.1准备目的细胞

1.4.3观察感染后细胞状态及感染效率

1.4.4 细胞状态

1.5 RT-PCR检测

1.5.1总RNA 抽提

1.5.2逆转录反应体系

1.5.3逆转录程序

1.5.4实时荧光定量反应体系

1.5.5定量PCR反应程序

1.6 Western Blot 检测

1.6.1细胞总蛋白抽提

1.6.2 SDS-PAGE

1.6.3免疫印迹（湿转）

1.6.4抗体杂交

1.6.5 X光显影

1.7.2细胞换液

1.7.3细胞传代

1.7.4细胞冻存

1.8细胞增殖实验

1.9细胞周期检测

1.10细胞迁移实验

1.11细胞侵袭实验

1.12细胞凋亡检测

1.13统计学处理

2 结果

2.1.1慢病毒感染细胞结果

2.1.3 Western Blot结果

2.2.1细胞增殖结果

2.2.2 流式-细胞周期结果

2.2.3 细胞迁移实验结果

2.2.4 细胞侵袭实验结果

2.2.5 流式-细胞凋亡实验结果

3 讨论

4 结论

参考文献

文献综述:抑癌基因ARID1A在肿瘤中的功能及机理的研究

参考文献

缩 略 语 表

攻读学位期间发表文章情况

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