干姜对寒饮蕴肺证大鼠的影响及组织分布的研究

摘要

目的：　　验证干姜水煎液对于慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证的治疗作用，阐明干姜治疗此病症之物质基础，通过研究干姜指标成分在慢阻肺寒饮蕴肺证大鼠体内代谢分布，探讨其归经。　　方法：　　将 Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性治疗组、干姜高剂量治疗组、干姜中剂量治疗组、干姜低剂量治疗组。造模第1、14天，各造模组大鼠（空白组除外），给予鼻腔滴注 LPS200μL/只,第2-30天（第14天除外），各造模组每天上午8:30置于染毒箱中给与烟熏30min，然后灌服相应剂量的冰水（1ml/100g）,其后将各造模组大鼠置于0℃左右的外界环境中给予寒冷刺激一个小时；下午2:30开始造模，将各造模组大鼠置于染毒箱中烟熏30min，其后置于0℃度左右环境中给与寒冷刺激1小时。造模第16天起，各用药组灌服相应剂量的干姜水煎液，阳性给药组给予相应剂量小青龙合剂，至造模结束。记录各组大鼠饮食量、饮水量、体重的变化，测定各组大鼠各主要脏器的脏器系数，测定大鼠的呼吸指标以及测定各大鼠 IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α、AQP1、Muc5ac的含量，测的数据用 SPSS17.0软件处理，探讨干姜对于慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证治疗作用。　　干姜高剂量给药组于大鼠最末一次给药以后5min、10min、20min、30min、40min、60min、90min、120min、240min、360min，各时间点取两只摘眼球取血，进一步验证干姜药效物质基础，应用 UV-HPLC检测含药血清和正常血清的 HPLC图谱，确定干姜入血的物质。取血后立即处死大鼠，取肝、心、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、脑、膀胱等组织，检测有效物质在各组织中的浓度，所得数据用 DAS3.0处理，通过对比干姜有效成分在大鼠脏器中的检测时间、浓度、维持时间等探讨干姜在慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠体内归经。　　结果：　　1、中剂量干姜水煎液能够显著改善慢阻肺寒饮蕴肺证大鼠的形态，显著增加用药组大鼠的体重与饮食量、饮水量。显著增加肺脏的脏器系数等，说明干姜具有治疗慢阻肺寒饮蕴肺证的药效。　　2、药效物质基础的确定：确定干姜入血的有效物质为6-姜酚、6-姜烯酚和8-姜酚。　　组织分布结果：在给药后的10个时间点，三种药效成分广泛存在与大鼠的肺、脾、肾、肝、心、大肠、胃、小肠等器官中。维持时间的比较结果是6-姜酚为脾＞胃＞肺=小肠＞大肠＞膀胱＞心＞肾＞肝＞血清=脑，6-姜烯酚为胃＞肺＞脾＞肝=大肠＞小肠=膀胱=心=肾＞脑>血清，8-姜酚为胃＞脾=小肠＞肺＞大肠＞脑=肝＞血清＞肾＞心＞膀胱。6-姜酚在组织中的 AUC0-t依次为胃＞脾＞小肠＞肾＞肺＞大肠＞心＞膀胱，6-姜烯酚在组织中的 AUC0-t依次为胃＞心＞大肠＞肺＞肾＞小肠＞脾＞肝＞膀胱＞脑，8-姜酚在组织中的 AUC0-t依次为胃＞大肠＞脾＞肝＞小肠＞血清＞脑＞肺。　　结论：　　干姜药效学实验表明其能够治疗慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证，8-姜酚、6-姜烯酚和6-姜酚能够在血清中检测到，且不同浓度的分布在肺、脾、肾、肝、心、胃等器官，从而进一步表明此三成分为干姜药效成分。分析三物质在组织中的最早检测时间、维持时间以及富集浓度等，得出干姜治疗慢阻肺寒饮蕴肺证主要归肺、脾、胃经，和文献资料中所记录的归经情况大致相符。

目录

声明

前言

第一部分 干姜干预慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证的药效研究

1. 材料

2 实验方法

3 实验结果

4 方法学考察

5 小结

第二部分 干姜有效物质在体内组织分布的观察

1.实验材料

2 实验方法

3 HPLC-UV含量测定方法

4 方法学考察

5 结果

6 小结

第三部分 讨论

1.寒饮蕴肺模型的意义

2 干姜有效成分及功效的认识

3干姜功效物质在寒饮蕴肺大鼠体内组织分布的意义

4 样品处理方法的选择

5药动学参数考察的讨论

结论

致谢

参考文献

附录

附录一 肺组织病理切片

附录二 干姜的现代研究进展