高血压及老年高血压大鼠血管平滑肌BKCa介导的肠系膜动脉舒张作用改变的机制研究

摘要

目的：本文旨在探究老年、高血压及老年高血压状态下TRPV4与BKca复合体在大鼠肠系膜动脉平滑肌中表达、功能的改变及对血管舒张的影响及其机制。　　方法：将雄性大鼠分为Wistar-Kyoto(WKY)大鼠（16周龄，正常血压），自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rat，SHR)(16周龄，高血压)，老年Wistar-Kyoto(old WKY)大鼠（≥18月龄，正常血压），老年自发性高血压大鼠(elderly spontaneously hypertensive rat，old SHR)（≥18月龄，高血压）四个组，并通过股动脉插管测量血压，确保模型成功建立。通过免疫荧光染色的方法检测TRPV4与BKca的关联。取去内皮肠系膜动脉三级分支，采用血管张力测定技术观察苯肾上腺素(Phenylephrine，PE)致血管收缩反应变化及TRPV4特异性激动剂GSK1016790A(GSK)在PE预收缩动脉上介导的血管舒张反应变化;Western blotting实验探究肠系膜动脉中肾上腺素能α1(ARα1)受体、TRPV4通道及BKca通道蛋白表达差异。　　结果：(1)各组大鼠心率无明显差别（P＞0.05）;与WKY组、old WKY组相比，SHR组、old SHR组收缩压及舒张压均显著增加(P＜0.05）。WKY组和SHR组的收缩压和舒张压分别为147.51±13.49mmHg vs212.68±20.83mmHg,95.19±10.98mmHg vs145.18±14.77mmHg(P＜0.05)。old WKY组和old SHR组的收缩压和舒张压分别为150.56±11.07mmHg vs227.04±25.69mmHg,94.75±10.47mmHg vs156.47±14.19mmHg(P＜0.05)，表明高血压模型建立成功。(2)免疫荧光结果显示在大鼠肠系膜动脉环组织、TRPV4和BKca共转染的HEK293细胞及大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞中TRPV4与BKca共定位。(3)血管张力实验显示60mmol/L高钾溶液引起SHR及old SHR肠系膜动脉收缩显著增加（P＜0.05）。PE浓度依赖性收缩去内皮肠系膜动脉，old SHR组较WKY组敏感性降低，但引起的最大收缩显著增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)。(4)TRPV4特异性激动剂GSK浓度依赖性舒张去内皮肠系膜动脉(EC50：57.82nmol/L)，BKca阻断剂(5mmol/L TEA)能显著阻断GSK介导的舒张反应（P＜0.05）。与WKY组相比，SHR组、old WKY组、old SHR组GSK介导的肠系膜动脉舒张效应显著降低(EC50分别为92.74nmol/L、120.58nmol/L、85.69nmol/L,P＜0.05)，其中old WKY组GSK介导的舒张效应降低最明显，EC50较WKY组高1倍。(5)Westernblotting结果显示，ARα1受体蛋白表达在old WKY组、old SHR组肠系膜动脉中显著下调，较WKY组差异具有统计学意义（P＜0.05）。TRPV4、BKCaβ1亚基蛋白表达在SHR组、old WKY组、old SHR组均显著下调，较WKY组差异具有统计学意义(P＜0.05)。与WKY组相比，BKcaα亚基在SHR组肠系膜动脉中的蛋白表达无显著差别(P＞0.05)，在old WKY组、old SHR组显著下调（P＜0.05），其中BKcaα亚基在old WKY组下调最明显，降低程度是WKY组的1.5倍。　　结论：(1)在高血压、老年、老年高血压状态下肠系膜动脉对PE的敏感性降低，该变化与肠系膜动脉中ARα1受体蛋白表达显著下调相关;在高血压、老年高血压下肠系膜动脉收缩功能增强，60mmol/L KCl和PE致肠系膜动脉最大收缩均显著增加。(2)TRPV4介导的肠系膜动脉舒张在高血压、老年、老年高血压状态下显著降低，且肠系膜动脉中TRPV4、BKCa蛋白表达存在不同程度下调，TRPV4-BKca复合物表达改变可能是导致肠系膜动脉舒张效应减弱的原因之一。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

结果

一、老龄及高血压时TRPV4-BKCa复合体在大鼠肠系膜动脉中的表达变化及其对苯肾上腺素致血管张力改变的影响

二、高血压时丹参酮ⅡA磺酸钠舒张动脉血管作用变化的研究

讨论

一、关于老龄及高血压时TRPV4-BKCa复合体在血管张力改变中的作用

二、关于高血压时DS-201舒张血管作用改变的机制

结论

参考文献

中英文缩略词对照表

致谢

一、硕士期间已发表论文和综述

二、硕士期间参与的学术会议

TRPV4调节血管张力作用的研究进展 综述

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