PcG蛋白HPC2的生物信息学分析及其在不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中的表达研究

摘要

目的:宫颈癌是全球女性恶性肿瘤中的常见疾病，严重威胁着女性的生命健康。作为发展中国家的中国每年的新发病例占世界总新发病例的30％左右，且宫颈癌患者以每年2％-3％的速度增长。近年来多个宫颈癌普查显示发病年龄趋于年轻化。现已有大量的研究表明HPV感染特别是高危型HPV病毒的感染是绝大多数宫颈癌癌前病变和宫颈癌的主要原因。而HPV16与HPV18在致宫颈癌的高危型HPV中最常见。多梳基因(Polycomb group，PcG)是近年来新发现的一个肿瘤相关基因。其已被证实为发育时维持同源异形基因稳定表现的重要因子，在胚胎发育、肿瘤发生和转移以及干细胞的维持中有着重要的作用。现已有多项研究表明PcG是一种肿瘤相关基因，参与鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等多种人类肿瘤的发生和发展。HPC2属于PcG基因家族成员，在多种癌组织中有大量表达。研究证实PcG蛋白HPC2在诱导癌细胞凋亡、调控细胞生长等方面的作用，并有研究表明HPC2在宫颈癌中的表达较正常宫颈组织明显增高，但其在宫颈癌组织中的表达及作用途径仍不明晰，需要进一步研究证实。因此深入了解与深入研究PcG蛋白HPC2的生物信息学功能及其与宫颈癌的关系很有必要，希望能为宫颈癌的发病机制的研究提供新的方向。本实验先通过生物信息学方法，对HPC2蛋白的氨基酸序列进行理化性质分析、亲/疏水性分析、细胞内的定位情况、结构域分析，并对其进行系统演化关系预测，为日后开展HPC2的相关研究提供理论依据。后通过体外培养不同HPV感染状态的宫颈癌细胞Siha(HPV16感染)，HeLa(HPV18感染)，C-33a（无HPV感染），探讨PcG蛋白HPC2在3种宫颈癌细胞中的表达情况，并比较PcG蛋白HPC2在不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中的表达是否存在差异，旨在为HPV致宫颈癌的作用机制提供一个新的研究方向。　　方法:1.体外培养三种宫颈癌细胞株;2.采用荧光定量RT-PCR，观察不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中HPC2基因的表达情况。比较Siha，HeLa，C-33a细胞中HPC2的表达有无差异;3.采用western blot技术，比较Siha，Hela，C-33a宫颈癌细胞中PcG蛋白HPC2的表达是否存在差异。　　结果:1.荧光定量RT-PCR结果显示:不同HPV感染状态下的宫颈癌细胞均有HPC2基因的表达。Hela、Siha细胞中的HPC2基因的表达较C-33a细胞明显下调，P值均小于0.05，有统计学意义。Hela与Siha细胞间HPC2基因的表达无明显差异，P=0.318＞0.05。2.Western Blot结果显示三种宫颈癌细胞中均有HPC2蛋白的表达，且C-33a中蛋白的表达比Hela、Siha细胞多，与RT-PCR结果一致。　　结论:1.宫颈癌SiHa，HeLa，C-33a细胞中均有PcG蛋白HPC2的表达。2.存在HPV感染的Siha，Hela细胞的HPC2表达与无HPV感染的C-33a细胞相比明显降低，而均被HPV感染的Siha、Hela细胞的HPC2表达无明显差异。3.HPC2蛋白的表达情况与HPV病毒感染具有相关性。

目录

摘要

前言

第一部分 PcG蛋白HPC2的生物信息学分析

一、材料

二、方法：对HPC2蛋白的进行生物信息学分析

三、结果

四、讨论

第二部分 不同HPV感染状态下的宫颈癌细胞中HPC2的表达研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

主要中英文缩略词对照表

致谢

PcG蛋白HPC2在宫颈癌发生中的作用 综述

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