白介素-37抗对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的作用研究

摘要

目的:通过建立对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的动物模型，初步探索白介素-37在肝损伤中的抗炎作用。　　方法:将雄性昆明小鼠随机分成4组(n=16)，即正常对照组（对照组）、对乙酰氨基酚肝损伤模型组（模型组）、IL-37干预组（预防组）、IL-37组，每组又按动物处死的时间点(12h，24h)随机分为2小组。对照组:生理盐水腹腔注射，2小时后腹腔注射PBS溶液;模型组:生理盐水腹腔注射，2小时后腹腔注射对乙酰氨基酚250mg/kg;预防组:IL-37b溶液1ug/只腹腔注射，2小时后腹腔注射等量的对乙酰氨基酚溶液;IL-37组:腹腔注射等量IL-37b溶液，2小时后腹腔注射PBS液。分别于12h及24h摘眼球取血后行颈椎脱臼法处死小鼠取出完整肝组织。行以下检测:(1)采用赖氏法检测小鼠血清中的ALT及AST水平;(2)采用ELISA法检测小鼠血清中的IL-1β，IL-6，TNF-α表达水平;(3)用电子天平称取肝脏重量，并计算出小鼠肝指数;(4)通过HE染色观察小鼠肝组织病理改变;(5)通过免疫组化的方法检测肝组织TNF-α、iNOS蛋白的表达。　　结果:(1)对小鼠ALT及AST的影响:模型组ALT水平(12h、24h)较对照组显著升高（P＜0.01），而AST只有24h较对照组显著升高(P＜0.01)，但模型组24h的ALT及AST较12h的都升高(P＜0.05);预防组ATL水平(12h、24h)与模型组相比显著降低(P＜0.01)，而AST只有24h较模型组显著降低(P＜0.01);IL-37组ALT及AST(12h，24h)与对照组相比无统计学差异（P＞0.05），且24h与12h相比无统计学差异(P＞0.05)。(2)对小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α影响:与对照组相比，模型组12h及24h血清中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平有升高(P＜0.05)，模型组24h的IL-1β、IL-6的水平较12h的显著升高(P＜0.01);预防组12h和24h的IL-1β、IL-6、TNF-α水平较对照组有升高(P＜0.05);IL-37组与对照组相比IL-1β、IL-6和TNF-α均无统计学差异(P＞0.05)，且24h与12h相比无统计学差异(P＞0.05)。与模型组相比，预防组的12h及24h的IL-1β、IL-6和TNF-αL水平显著降低(P＜0.01)。(3)小鼠肝指数的比较:与对照组相比，模型组12h及24h的肝指数显著升高(P＜0.01)，且模型组12h与24h相比有升高(P＜0.05);IL-37组与对照组比较肝指数无统计学差异（P＞0.05），且24h与12h相比无统计学差异(P＞0.05);与模型组比较，预防组肝指数显著降低(P＜0.01);(4)肝组织TNF-α、iNOS的比较:与对照组相比:模型组12h及24h的iNOS、TNF-α蛋白的表达显著升高(P＜0.01)，预防组与对照组相比有升高(P＜0.05)，IL-37组与对照组比无统计学差异(P＞0.05)，与模型组相比:预防组iNOS、TNF-α蛋白的表达显著减少(P＜0.01)。模型组iNOS量24h与12h相比显著升高(P＜0.05)，而TNF-α含量12h表达与24h相比有升高(P＜0.05)。　　结论:(1)成功的构建了对乙酰氨基酚肝损伤的动物模型，并应用IL-37干预了小鼠的肝损害。(2)模型组小鼠血清中的ALT、AST、IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高，IL-37可降低上述指标的表达水平。(3)模型组肝指数升高，肝损伤程度加重，肝组织TNF-α、iNOS蛋白表达升高，IL-37可改善组织学及降低上述因子的表达水平。(4) IL-37对肝脏无损害。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 主要实验试剂

3 主要实验仪器

4 实验方法

结果

1 小鼠的一般情况

2 IL-37对小鼠血清ALT及AST的影响

3 IL-37对小鼠血清IL-1β、IL-6及TNF-α的影响

4 小鼠肝脏组织解剖情况及肝指数

5 HE染色光镜观察结果

6 IL-37对小鼠肝组织TNF-α及iNos表达的影响

讨论

1 对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤模型的建立

2 IL-37对小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响

3 IL-37对小鼠肝组织iNOS的影响

结论

参考文献

英文缩写词与中英文索引

附图

致谢

综述 药物性肝损伤的研究进展

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