Hu IL-37对寻常型银屑病角质形成细胞抗炎、抗增殖研究

摘要

目的:银屑病是一种以角质形成细胞(keratinocyte，KC)异常分化、过度增殖为特征的常见的慢性炎性皮肤病。其确切病因尚不清，但可能与遗传、环境和免疫因素有关。目前认为白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)等免疫炎性因子在银屑病的发生发展中起重要促进作用。IL-37作为一种新型炎性抑制因子，通过抑制促炎细胞因子、趋化因子等的产生以及对基因转录的调控，在多种炎性反应及免疫相关性疾病中起重要的拮抗作用。但目前未见IL-37对人银屑病皮损作用的相关报道。本研究通过观察重组人IL-37蛋白（recombinant human IL-37，Hu IL-37）对人寻常型银屑病皮损KC中IL-6、TNF-α和IFN-γ mRNA表达的影响及对细胞增殖的影响，初步探讨Hu IL-37在人银屑病中的抗炎、抗增殖效应，为银屑病的治疗提供新的治疗思路与可能的靶点。　　方法:1.收集进行期寻常型银屑病患者5例，切取患者皮损区皮肤进行原代培养，获得KC。2.将培养的KC分为A、B、C、D4组。其中A组、B组和C组分别加入浓度梯度逐渐升高的Hu IL-37（A组:10ng/ml，B组:100ng/ml，C组:200ng/ml）进行干预细胞，D组（对照组）不作任何干预措施。24h后收集细胞，采用CCK-8法分别检测4组细胞的增殖情况;采用荧光定量PCR法分别检测4组细胞中IL-6、TNF-α和IFN-γ mRNA表达水平。　　结果:1.二步消化法联合无血清培养法可以分离和培养出人KC。2.Hu IL-37对人寻常型银屑病皮损KC增殖的影响:不同浓度Hu IL-37分别干预细胞24h后，B组和C组的细胞数均明显低于D组(P＜0.05)，尤以C组为甚;而A组与D组相比细胞数无统计学差异(P＞0.05)。A组、B组和C组细胞增殖的抑制率分别为（10.49±5.65）％、（25.47±6.13）％和（42.49±3.81）％，其中C组均高于A组和B组(P＜0.05)，B组高于A组(P＜0.05)。3.Hu IL-37对人寻常型银屑病皮损KC中IL-6、TNF-α和IFN-γ mRNA表达的影响:不同浓度Hu IL-37分别干预细胞24h后，A组、B组和C组中IL-6 mRNA表达水平均低于D组(P＜0.05)，且C组IL-6 mRNA表达水平均低于B组和A组(P＜0.05)，B组IL-6 mRNA表达水平低于A组(P＜0.05)。B组和C组中TNF-α mRNA表达水平均低于D组(P＜0.05)，A组与D组中TNF-α mRNA表达水平无统计学差异(P＞0.05)，B组和C组TNF-αmRNA表达水平均低于A组(P＜0.05)，B组与C组中TNF-α mRNA表达水平无统计学差异(P＞0.05)。A组、B组和C组细胞中IFN-γ mRNA表达水平均低于D组(P＜0.05)，且C组IFN-γ mRNA表达水平均低于B组和A组(P＜0.05)，B组IFN-γ mRNA表达水平低于A组(P＜0.05)。　　结论:1.HuIL-37可抑制人寻常型银屑病皮损KC增殖，且在一定浓度范围内存在量-效关系，浓度越高，对细胞增殖的抑制作用越强。2.Hu IL-37可降低人寻常型银屑病皮损KC中IL-6、TNF-α和IFN-γ mRNA表达，具有抗炎作用;且在一定浓度范围内存在量-效关系，浓度越高，作用越明显。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 主要试剂配制

3 方法

4 统计学处理

结果

1 银屑病皮损KC的分离、培养结果

2 Hu IL-37对银屑病皮损KC增殖的影响

3 Hu IL-37对银屑病皮损KC中IL-6、TNF-α和IFN-γ mRNA表达的影响

讨论

一 银屑病皮损KC的分离、培养

二 Hu IL-37抗寻常型银屑病皮损KC增殖作用

三 Hu IL-37抗寻常型银屑病皮损KC中IL-6、IFN-γ和TNF-α mRNA表达

结论

参考文献

英文缩略词对照表

致谢

综述 IL-37及其与疾病相关性的研究进展

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