声明
摘要
缩写词表
第一章研究背景
1.1纤维素资源的开发和利用
1.2木质纤维素
1.3降解纤维素的微生物
1.4微生物降解纤维素的策略
1.5脂多糖
1.5.1膳多糖的结构
1.5.2脂多糖的合成
1.6IX型分泌系统
1.7Cytophaga hutchinsonii的研究背景
1.7.2 C. hutchinsonii的研究进展
1.8论文的立题依据和工作思路
第二章在C.hutchinsonii中插入突变筛选菌株以及部分基因的缺陷菌株的构建
2.1材料与方法
2.1.1菌种和质粒
2.1.2引物
2.1.3主要仪器和试剂
2.1.4培养基
2.1.5分子生物学反应体系
2.1.6C.hutchinsonii感受态的制备
2.1.9E.coil感受态的制备
2.1.10 E.coli热激转化
2.1.11基因敲除
2.1.12滤纸降解实验
2.1.13软琼脂扩散实验
2.2结果
2.2.1筛选滤纸降解缺陷株
2.2.2生物信息学分析
2.2.3基因敲除株的构建及表型验证
2.3讨论
第三章chu_2177和chu_2178的功能研究
3.1材料与方法
3.1.1菌种和质粒
3.1.2引物
3.1.3主要仪器和试剂
3.1.4培养基
3.1.5分子生物学反应体系
3.1.6 C.hutchinsonii感受态的制备和电击转化
3.1.8.3突变株的回补
3.1.9滤纸降解实验
3.1.10软、硬琼脂扩散实验
3.1.12生长曲线的测定
3.1.13生物信息学分析
3.1.14LPS的提取
3.1.15LPS的电泳与银染
3.1.16纤维素酶活的测定
3.1.17纤维素吸附率测定
3.1.18扫描电子显微镜(SEM)观察菌体在滤纸纤维上的排布
3.1.19细胞各组分蛋白的提取
3.1.20聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
3.1.21蛋白免疫印迹杂交(Western blot)
3.1.22纤维素内切酶酶活的复性电泳
3.1.23生物膜
3.1.24胞外多糖的检测
3.1.25细胞抗逆能力的测定
3.2实验结果
3.2.1生物信息学分析
3.2.2基因敲除
3.2.4chu_2176、chu_2177、chu_2178对纤维素降解的影响
3.2.5chu_2177、chu_2178对菌体运动的影响
3.2.7 chu_2177、chu_2178对纤维素吸附能力的影响
3.2.8 chu_2177、chu_2178对纤维素酶酶活的影响
3.2.9 chu_2177、chu_2178对外膜和胞外蛋白的影响
3.2.10 chu_2177、chu_2178对胞外多糖的影响
3.2.11 chu_2177、chu_2178对生物膜的影响
3.2.12 chu_2177、chu_2178对抗逆性的影响
3.3讨论
第四章chu_1927、chu_2532和chu_3392的功能研究
4.1材料与方法
4.1.1菌种和质粒
4.1.2引物
4.1.3主要仪器和试剂
4.1.4培养基
4.1.5分子生物学反应体系
4.1.13生物信息学分析
4.1.14LPS的提取
4.1.15LPS的电泳与银染
4.1.16纤维素酶活的测定
4.1.17纤维素吸附率测定
4.1.18扫描电子显微镜(SEM)观察菌体在滤纸纤维上的排布
4.1.19外膜蛋白的提取
4.2.1生物信息学分析
4.2.2基因敲除
4.2.3 chu_1927、chu_2532、chu_3392参与LPS的合成
4.2.5 chu_1927、chu_2532、chu_3392对菌体运动的影响
4.2.7chu_1927、chu_2532、chu_3392对纤维素吸附能力的影响
4.2.8chu_1927、chu_2532、chu_3392对纤维素酶酶活的影响
4.2.10 chu_1927、chu_2532、chu_3392对生物膜的影响
4.3讨论
全文总结及展望
参考文献
在读期间发表的学术论文
致谢
学位论文评阅及答辩情况表
山东大学;