结核分枝杆菌Rv0927c基因缺失株的构建及其生物学特性鉴定

目录

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摘要

符号说明

综述 结核分枝杆菌基因敲除技术的研究进展

1结核分枝杆菌的病原学及其致病机制

2基因敲除技术

2．1特异性转导法

2．2线性DNA片段法

2．3反选择标记法

2．4CRISPR基因敲除法

3结语

第一章结核分枝杆菌Rv0927c基因缺失株的构建与鉴定

1材料和方法

1．1材料

1．2Rv0927c基因序列的生物信息学分析

1．3引物的设计与合成

1．4结核分枝杆菌基因组DNA的提取

1．5同源重组载体的构建与鉴定

1．6Rv0927c重组噬菌体的制备与鉴定

1．7Rv0927c基因缺失株的构建与鉴定

1．8H37RaΔRv0927c基因回补株的构建与鉴定

2结果

2．1Rv0927c基因序列的生物信息学分析

2．2同源重组载体的鉴定

2．3Rv0927c重组噬菌体的鉴定

2．4Rv0927c基因缺失株的鉴定

2．5H37RaΔRv0927c基因回补株的鉴定

3讨论

第二章结核分枝杆菌Rv0927c基因缺失株生物学特性鉴定

1材料和方法

1．1材料

1．2结核分枝杆菌ΔRv0927c生长曲线检测

1．5结核分枝杆菌ΔRv0927c生物被膜检测

1．7结核分枝杆菌ΔRv0927c NF-κB信号通路检测

1．8结核分枝杆菌ΔRv0927c胞内存活检测

1．9流式细胞因子表达量检测

2结果

2．2结核分枝杆菌ΔRv0927c形态学观察

2．3结核分枝杆菌ΔRv0927c抗逆性检测结果

2．4结核分枝杆菌ΔRv0927c生物被膜特性

2．7结核分枝杆菌ΔRv0927c的胞内存活

2．8流式细胞因子表达量检测结果

3讨论

结语

参考文献

攻读学位期间取得的学术成果

致谢