OsAE7与ZFP36相互作用的鉴定及OsAE7在水稻干旱及盐胁迫中的作用

目录

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摘要

中英文对照缩略语表

第一章文献综述

1ABA参与植物应答非生物胁迫的过程

1．1ABA发现简史

1．2ABA信号通路

1．3ABA在植物中引起的生物学效应

2ABA诱导产生的ROS参与植物生长发育的调控

2．1ABA与ROS

2．2ROS对植物的影响

2．3ROS的产生与清除

3锌指转录因子

4OsAE7与CIA循环

5本研究的目的和意义

第二章OsAE7与ZFP36相互作用的验证

1实验材料与引物

1．1实验材料

2实验方法

2．1基因克隆及载体构建

2．2质粒大量提取及纯化

2．3酵母双杂交实验

2．4GST pull-down

2．5萤火虫荧光素酶互补成像系统(LCI)

2．6水稻原生质体的提取与转化

3实验结果与分析

3．1酵母双杂交实验验证ZFP36与OsAE7相互作用

3．2GST pull-down验证ZFP36与OsAE7相互作用

3．3萤火虫荧光素酶互补成像系统验证ZFP36与OsAE7相互作用

3．4OsAE7的亚细胞定位

4讨论

第三章OsAE7参与ABA信号通路

1实验材料与引物

1．1实验材料

1．2引物

2实验方法

2．1水稻叶片总RNA的提取与水稻cDNA的获得

2．2实时荧光定量PCR

3实验结果与分析

3．1外源ABA、H2O2对OsAE7基因表达的影响

3．2 DMTU、DPI预处理对ABA诱导OsAE7基因表达的影响

3．3 NaCl、PEG对OsAE7基因表达的影响

4讨论

第四章osae7-KO突变体的获得及耐逆性分析

1实验材料与试剂

1．1实验材料

1．2实验试剂

1．3引物

2实验方法

2．1CTAB法提取水稻总DNA

2．2粗蛋白酶液的提取

2．3抗氧化防护酶活性测定

2．4丙二醛(MDA)活性的测定

2．5相对含水量(RWC)测定

2．6质膜相对透性的测定

2．7脯氨酸(proline)含量测定

3实验结果与分析

3．1osae7-KO突变体的获得与鉴定

3．2osae7-KO突变体耐逆性表型分析

3．3osae7-KO突变体耐逆性生理指标的测定

3．4OsAE7基因的敲除降低了水稻对ABA的敏感性

3．5OsAE7基因与ZFP36基因的上下游关系

4讨论

第五章全文总结

1研究小结

1．1OsAE7和ZFP36相互作用

1．2OsAE7参与ABA信号通路

1．3OsAE7基因的敲除降低了水稻对干旱和盐胁迫的耐受性及对ABA的敏感性

2创新之处

3不足之处

参考文献

致谢

攻读学位期间发表与投送的论文