ZmMAPK5与靶蛋白的相互作用鉴定及ZmPPa4转基因烟草在盐胁迫下的功能分析

目录

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摘要

中英文对照缩略词表

第一章文献综述

1盐胁迫

1．1盐胁迫对植物的影响

1．2盐胁迫下的响应机制

1．3高等植物耐盐性基因的研究

2MAPK级联系统与研究进展

2．1MAPK级联系统

2．2MAPK的研究进展

3无机焦磷酸酶

3．1无机焦磷酸酶的分类

3．2无机焦磷酸酶的研究进展

4本研究的目的和意义

第二章ZmMAPK5与靶蛋白相互作用的验证

1实验材料

1．1植物材料的种植和培养

1．2菌株与载体

1．3实验试剂

1．4实验仪器

1．5引物合成及序列

2实验方法

2．1玉米叶片中RNA的提取

2．2cDNA的合成

2．3载体构建

2．4酵母的转化

2．5 GSTpull-down

2．6农杆菌的转化

2．7烟草瞬时表达方法

3．1载体构建

3．2原核蛋白的表达与纯化

3．3ZmMAPK5和ZmPPa4的互作鉴定

3．4ZmMAPK5和ZmNAC84的互作鉴定

3．5ZmMAPK5和ZmRNP的互作鉴定

3．6ZmMAPK5和ZmTPI的互作鉴定

3．7ZmMAPK5和ZmALT的互作鉴定

4讨论

第三章ZmPPa4的初步功能分析

1实验材料

1．1植物材料的种植及培养

1．2菌株与载体

1．3实验试剂

1．4实验仪器

1．5引物合成及序列

2实验方法

2．1载体构建

2．2玉米原生质体的分离和转化

2．3原生质体中抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定

2．4原生质体中超氧物歧化酶(SOD)活性的测定

2．5蛋白含量测定

2．6农杆菌转化

2．7烟草瞬时过表达

2．8体外凝胶激酶反应

3实验结果

3．1载体构建

3．2 ZmPPa4的结构和进化树分析

3．3ZmPPa4在抗氧化防护过程中的作用

3．4ZmPPa4在烟草中的亚细胞定位

3．5ZmMPK5是否磷酸化ZmPPa4

4讨论

第四章ZmPPa4过表达转基因烟草的耐逆性及表型分析

1材料

1．1实验材料与处理

1．2实验菌株和质粒载体

1．3实验试剂

1．4实验仪器

1．5引物合成及序列

2实验方法

2．1载体构建

2．2农杆菌的转化

2．3过表达转基因烟草的获得

2．4转基因烟草的鉴定

2．5耐逆性及表型分析

3结果与分析

3．1载体构建

3．2ZmPPa4转基因烟草的获得

3．3ZmPPa4转基因烟草植株的鉴定

3．4半定量RT-PCR检测基因的表达

3．5ZmPPa4过表达转基因烟草耐盐性分析

3．6盐胁迫条件下ZmPPa4过表达转基因烟草的生理生化指标检测

4讨论

第五章全文总结

1研究小结

2创新之处

3不足之处

参考文献

致谢

攻读学位期间发表与投送的论文